参苓白术散通过IκBα/NF-κB通路调控Lewis肺癌小鼠肿瘤自噬的研究

目的 观察培土生金法代表方参苓白术散对Lewis肺癌小鼠模型肿瘤组织IκBα/NF-κB信号通路以及肿瘤自噬的干预作用,探讨参苓白术散联合顺铂对肺癌的部分治疗机制。方法 选取SPF级雄性C57BL/6J小鼠40只,采用腋窝皮下接种肺癌Lewis细胞悬液法建立Lewis肺癌小鼠模型,建模成功后随机分为4组：模型组、顺铂组、中药组和中药+顺铂组,每组10只。模型组给予等量蒸馏水灌胃;顺铂组每周给与腹腔注射顺铂（5 mg·kg^-1）一次,共2次;中药组每日给与参苓白术散（9.36g·kg^-1）灌胃一次,连续14天;中药+顺铂组每日给与参苓白术散（9.36g·kg^-1）灌胃一次,连续14天,同时每周给与腹腔注射顺铂（5mg·kg^-1）一次,共2次。给药14天后,测定各组小鼠肿瘤体积,并计算相对肿瘤体积和相对肿瘤增殖率;采用ELISA法测定肿瘤组织中肿瘤坏死因子-α（tumor necrosis factor-α, TNF-α）和白细胞介素-1（interleukin-1β, IL-1β）的含量;采用透射电镜观察肿瘤细胞超微形态的变化;采用免疫组化法测定核因子κB抑制蛋白α（NF-kappa-B inhibitor alpha, IκBα）和核因子-κB（nuclear factor-κ-gene binding, NF-κB）P65的蛋白表达水平;采用Western blot法测定自噬相关基因3（autophagy related gene 3, Atg3）、自噬相关基因5（autophagy related gene 5, Atg5）、自噬特异性基因（Beclin-1）和微管相关蛋白1轻链3（Microtubule-associated protein 1 light chain 3, LC3）的蛋白表达水平。结果 与模型组比较,顺铂组、中药组、中药+顺铂组小鼠肿瘤体积和相对肿瘤体积显著减小（P<0.01）,肿瘤组织TNF-α、IL-1β含量显著降低（P<0.01）,IκBα蛋白表达水平显著升高（P<0.01）、NF-κB P65蛋白入核率显著降低（P<0.01）,Atg3、Atg5、Beclin-1和LC3II/LC3I的蛋白表达水平显著升高（P<0.01）,和顺铂组比较,中药组和中药+顺铂组肿瘤组织TNF-α、IL-1β含量显著降低（P<0.01）,中药+顺铂组肿瘤组织LC3II/LC3I的蛋白表达水平显著升高（P<0.01）。结论 参苓白术散能够上调IκBα蛋白表达,抑制NF-κB的激活,降低肿瘤组织中促炎因子TNF-α、IL-1β的含量,调控肿瘤组织炎症反应,改变肿瘤微环境,并上调肺癌组织Atg3、Atg5、Beclin-1和LC3II/LC3I的蛋白表达水平,激活肿瘤发生自噬,抑制肿瘤的生长。