日本血吸虫Sj26gst mRNA候选疫苗的免疫原性研究

目的 制备日本血吸虫谷胱甘肽S?转移酶相对分子质量（Mr） 26 000亚基（Sj26gst） mRNA并评价其免疫原性。方法 根据Sj26gst编码区序列（NC＿002544.1），用人类常用的密码子优化Sj26gst编码序列，两端加β球蛋白3′和5′非编码区（UTR），合成后连接至pcDNA3.1(+)，构建pcDNA3.1/Sj26gst质粒，以线性化的pcDNA3.1/Sj26gst质粒为模版，体外转录Sj26gst mRNA。用脂质体将Sj26gst mRNA转染至HeLa细胞中，转染后2、6、12、24、48 h取HeLa细胞，免疫荧光定量PCR (qRT?PCR)检测Sj26gst mRNA的相对水平，蛋白质免疫印迹（Western blotting）检测Sj26GST蛋白的表达水平。雌性BALB/c小鼠随机均分为Sj26gst mRNA组、pcDNA3.1/Sj26gst组、pcDNA3.1组和PBS组（每组6只），分别于小鼠左后腿股四头肌肌内注射100μg的Sj26gst mRNA、pcDNA3.1/Sj26gst质粒、pcDNA3.1质粒和PBS (100μl)，共...