运动员骨关节损伤体外细胞成骨分化机制探讨

目的 通过体外实验探讨P物质受体NK1(NK1-R)在骨髓间充质干细胞（大鼠骨髓基质干细胞，ST2）中的表达及其与成骨分化标记物的关系。方法 将骨髓间充质干细胞（ST2）细胞株接种于培养皿传代培养，培养基为高糖DMEM培养基（含10%FBS），放置于5%CO2细胞培养箱中37°C孵育72 h传代，至第三四代时使用。实验组加入含10-6mol/L浓度的P物质的成骨诱导培养液，对照组为不含P物质的成骨诱导培养液，培养7天，分别在第1,3,5,7天收获细胞进行NK1受体的免疫细胞化学染色，分析其阳性表达率。同一批细胞在1,3,5,7天收获细胞培养液，用ELISA检测ALP、OCN（骨钙素），分析其表达量的变化。结果 细胞免疫化学显示第1天时NK1受体即开始表达，第3,5天表达上升，1周时NK1受体明显表达，其存在于细胞膜和细胞质，主要存在于细胞质中，成骨分化标记物中成骨分化早期标记物ALP第1,3,5,7天表达量为1.695 ng/ml,5.013 ng/ml,7.94 ng/ml和9.932 ng/ml，随着时间推移表达量逐渐增加，成骨分化晚期标记物OCN在1,3,5天表达量很少，分别为1...