桃叶珊瑚苷对膝骨关节炎小鼠的作用及机制实验研究

目的:探讨桃叶珊瑚苷对膝骨关节炎(KOA)小鼠的作用及对细胞自噬和磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(PI3K/AKT/mTOR)信号通路的影响。方法:采用改良的Hulth法制备膝关节KOA小鼠模型，随机分为模型组、桃叶珊瑚苷组、激动剂组、桃叶珊瑚苷+激动剂组，另设正常对照组，每组各10只。桃叶珊瑚苷组小鼠给予80 mg/kg桃叶珊瑚苷灌胃；激动剂组小鼠腹腔注射0.5μmol/kg 740Y-P;桃叶珊瑚苷+激动剂组小鼠给予80 mg/kg桃叶珊瑚苷灌胃，同时0.5μmol/kg 740Y-P腹腔注射；正常对照组和模型组小鼠分别灌胃和腹腔注射等体积0.9%氯化钠溶液，1次/d,连续12周。采用HE染色和番红O-固绿染色观察软骨组织病理形态学变化，Mankin评分评估KOA严重程度。ELISA法检测软骨组织中白细胞介素-6(IL-6)、IL-1β和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平。实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法检测自噬相关基因(Atg5、Atg12、Baclin-1、LC3)、PI3K、AKT和mTOR mRNA水平。蛋白印迹法检测自噬相关蛋白、LC3Ⅱ/Ⅰ...