| 摘 要： | 目的:探讨血卟啉衍生物(HPD)介导的光动力疗法对人肺腺癌A549细胞杀伤机制。方法:将人肺腺癌A549细胞体外培养后,取对数生长期的细胞分别与不同浓度HPD:5、10、12、15、20μg/m L孵育4 h后,给予不同功率密度的激光(25、50、75、100 m W/cm2)进行照射,同时设立单纯HPD组(仅给HPD,无激光照射);单纯激光照射组(仅给予激光照射,无光敏剂)及空白对照组(无光敏剂及激光照射)。采用CCK8法检测细胞存活率,Hoechst 33 258染色法及Anexin V-PI双染法检测细胞凋亡,RTPCR法检测Bcl-2、Bax的mRNA表达水平。结果:单独给予HPD或激光照射对人肺腺癌A549细胞无杀伤作用,二者联合时随HPD浓度及激光功率密度的增高杀伤效应明显。CCK8结果显示:15μg/m L的HPD组、20μg/ml的HPD组A549细胞活力较对照组明显下降(P0.05)。50 m W/cm2组、75 m W/cm2组、100 m W/cm2组A549细胞活力与对照组比较明显降低(P0.001);Honchest 33258染色显示:随着HPD浓度的增加,细胞呈现出染色质固缩、细胞核浓染;Annexin V-FITC/PI双染法检测细胞凋亡,空白对照组凋亡率为(2.529±0.14)%、单纯光照组凋亡率为(2.372±0.17)%、单纯HPD组凋亡率为(2.462±0.28)%、光动力治疗组凋亡率为(35.837±4.15)%,组间比较差异具有统计学意义(P0.001),光动力治疗组与空白组比较,差异具有统计学意义(P0.001);RT-PCR结果显示:HPD-PDT可以上调Bax的mRNA水平及下调bcl-2的mRNA水平。结论:在体外HPD-PDT对人肺腺癌A549细胞有显著的杀伤效应,其杀伤效应通过上调Bax与下调Bcl-2途径实现。
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