| 新型重组融合毒素蛋白B7-2-PE40KDEL部分表征的鉴定 |
| |
| 引用本文： | 关海容,孙玉英,袁志宏,张惠丽,梁飞,刘楠,郭斯启,习彩霞,奚永志.新型重组融合毒素蛋白B7-2-PE40KDEL部分表征的鉴定[J].中国免疫学杂志,2008,24(2):157-160,166. |
| |
| 作者姓名： | 关海容 孙玉英 袁志宏 张惠丽 梁飞 刘楠 郭斯启 习彩霞 奚永志 |
| |
| 作者单位： | 北京军事医学科学院附属医院免疫学研究室及国家生物医学分析中心免疫学研究室,北京,100071 |
| |
| 摘 要： | 目的：对构建的新型重组B7-2-PE40KDEL外毒素融合蛋白的部分表征进行分析鉴定。方法：采用SDS-PAGE相对分子量、胰蛋白酶消化的MALDI-TOF-MS质谱、蛋白印迹、全波长扫描和MTT法分别测定该融合蛋白相对分子量、肽谱、抗原特异性以及靶向杀伤生物学活性。结果：B7-2-PE40KDEL经12%SDS-PAGE蛋白电泳和凝胶成像系统分析计算,其相对分子量为72628,与理论预测值69561相比误差在5%之内;全波长扫描分析显示该目的蛋白分别在225nm和276nm处各有一吸收峰;MALTI-TOF-MS质谱测定共获得15个与理论预测值相符的肽段,经瑞士生物信息研究所的EXPASY分子生物服务网站的Peptident数据库搜索证明,在分子量为60000～80000的范围内未检索到与上述条件相符的已知蛋白,证明本融合蛋白为全新蛋白,与我们预测的目的蛋白相符;Westernblot实验显示B7-2-PE40KDEL能与人B7-2及PEA抗体特异性结合;MTT杀伤活性测定表明,该融合蛋白对表达CD28^＋的人T淋巴瘤细胞系Jurkat产生特异性杀伤,而对不表达的CD28^-淋巴细胞系Raji无任何杀伤。结论：重组B7-2-PE40KDEL外毒素融合蛋白为一全新的具有靶向B7：CD28细胞杀伤活性的蛋白质。
|
| 关 键 词： | 重组外毒素融合蛋白 B7-2-PE40KDEL 肽谱 抗原特异性 生物学活性 重组融合 毒素蛋白 表征 fusion protein recombinant physical properties biochemical 蛋白质 细胞杀伤活性 Raji 淋巴瘤细胞系 特异性杀伤 Jurkat 表达 活性测定 特异性结合 抗体 实验 Western blot |
| 文章编号： | 1000-484X（2008）02-0157-04 |
| 收稿时间： | 2006-11-30 |
| 修稿时间： | 2007-05-11 |
Analysis of biochemical and physical properties for a new recombinant B7-Pseudomonas exotoxin fusion protein B7-2-PE40KDEL |
| |
| GUAN Hai-Rong,SUN Yu-Ying,YUAN Zhi-Hong,ZHANG Hui-Li,LIANG Fei,LIU Nan,GUO Si-Qi,XI Cai-Xia,XI Yong-Zhi.Analysis of biochemical and physical properties for a new recombinant B7-Pseudomonas exotoxin fusion protein B7-2-PE40KDEL[J].Chinese Journal of Immunology,2008,24(2):157-160,166. |
| |
| Authors: | GUAN Hai-Rong SUN Yu-Ying YUAN Zhi-Hong ZHANG Hui-Li LIANG Fei LIU Nan GUO Si-Qi XI Cai-Xia XI Yong-Zhi |
| |
| Abstract: | |
| |
| Keywords: | Recombination exotoxin fusion protein B7-2-PE40KDEL Peptide mass fingerprinting Antigen specificity Biogical activity |
| 本文献已被 维普 万方数据 等数据库收录！ |
|
