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STAT3siRNA对肺腺癌A549细胞STAT3表达和细胞生物学行为的影响
引用本文:张洁,罗麟洁,徐丽娜,房洁,王鸿程.STAT3siRNA对肺腺癌A549细胞STAT3表达和细胞生物学行为的影响[J].中国免疫学杂志,2010,26(11).
作者姓名:张洁  罗麟洁  徐丽娜  房洁  王鸿程
作者单位:泸州医学院附属医院呼吸科,泸州,646000
基金项目:四川省科技厅重点资助基金项目 
摘    要:目的:观察经RNA干扰沉默STAT3基因对人肺腺癌细胞A549生长和凋亡的影响。方法:设计并经化学合成了针对STAT3基因不同位点的3条小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)序列(STAT3siRNA1、STAT3siRNA2、STAT3siRNA3),在脂质体(LipofectamineTM2000)介导下转染人肺腺癌细胞株A549,采用RT-PCR法检测STAT3mRNA表达变化,筛选出抑制作用最强的STAT3-siRNA。免疫印迹法检测细胞STAT3、Cyclin D1、BAX、Bcl-2、Caspase-9蛋白表达。AM-BLUE法测定A549细胞体外增殖情况。流式细胞仪检测细胞凋亡。结果:经RNA干扰能有效降低A549细胞STAT3mRNA表达水平(P0.05),转染STAT3siRNA后,A549细胞STAT3、Cyclin D1、Bcl-2蛋白的表达水平均显著降低(P0.05),而BAX、Caspase-9蛋白的表达水平升高(P0.05)。STAT3蛋白表达分别与CyclinD1、Bcl-2蛋白表达呈正相关(r=0.854,0.910,P0.05);与BAX蛋白表达呈负相关性(r=-0.848,P0.05);与Caspase-9蛋白表达呈无相关性(r=-0.787,P0.05)。RNA干扰法沉默STAT3基因表达后,A549细胞增殖受到明显抑制,细胞凋亡率明显增加。结论:STAT3siRNA可有效抑制A549细胞STAT3表达,抑制A549细胞生长并促进其凋亡。

关 键 词:肺癌  RNA干扰  凋亡

Silencing of STAT3 by STAT3siRNA influences biological behavior of lung adeno-carcinoma cell line A549
ZHANG Jie,LUO Lin-Jie,XU Li-Na,FANG Jie,WANG Hong-Cheng.Silencing of STAT3 by STAT3siRNA influences biological behavior of lung adeno-carcinoma cell line A549[J].Chinese Journal of Immunology,2010,26(11).
Authors:ZHANG Jie  LUO Lin-Jie  XU Li-Na  FANG Jie  WANG Hong-Cheng
Abstract:
Keywords:STAT3
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