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槲皮素保护H2O2诱导的H9C2心肌细胞氧化损伤的作用机制
引用本文:霍魁媛,常宏,王勇,李春,唐炳华. 槲皮素保护H2O2诱导的H9C2心肌细胞氧化损伤的作用机制[J]. 中国实验方剂学杂志, 2016, 22(15): 122-127
作者姓名:霍魁媛  常宏  王勇  李春  唐炳华
作者单位:北京中医药大学基础医学院, 北京 100029,北京中医药大学基础医学院, 北京 100029,北京中医药大学基础医学院, 北京 100029,北京中医药大学基础医学院, 北京 100029,北京中医药大学基础医学院, 北京 100029
基金项目:国家“十二五”科技支撑计划项目(2012BAI29B07);国家自然科学基金项目(81202788,81473456,81470191,81302908,81530100);北京市自然科学基金项目(7142099);北京中医药大学优秀青年基金项目(2015-JYB-XYQ001)
摘    要:目的:探讨在H_2O_2诱导的氧化应激损伤中槲皮素对H9C2心肌细胞存活率、活性氧分子(ROS)、还原型辅酶Ⅱ(NADPH)氧化酶、细胞凋亡等关键因子的影响,初步阐明槲皮素对心肌细胞的保护机制。方法:H_2O_2刺激H9C2心肌细胞建立氧化应激损伤模型,分为正常组、模型组、槲皮素组,采用噻唑蓝(MTT)法检测心肌细胞活力,活性氧检测试剂盒检测槲皮素处理后ROS变化,流式细胞术检测各组细胞凋亡率,实时荧光定量PCR(Real-time PCR)与蛋白免疫印迹法(Western blot)分别检测细胞氧化应激反应、细胞凋亡机制相关分子[NADPH氧化酶-4(NOX-4),NADPH氧化酶亚单位p22phox,B淋巴细胞瘤-2原瘤基因(Bcl-2),Bcl-2相关X基因(Bax),半胱胺酸蛋白酶-8(Caspase-8)]基因和蛋白表达水平。结果:10μmol·L-1槲皮素具有显著的抗氧化、抗凋亡作用。与模型组比较,槲皮素组细胞存活率明显提高(P0.05),ROS水平与细胞凋亡率明显降低(P0.05,P0.01)。此外,槲皮素组中Bcl-2,NOX-4基因表达上调(P0.05);p22phox,Bax,Caspase-8基因表达明显下调(P0.05)。同时槲皮素能够抑制Bax,p22phox蛋白的表达(P0.05),上调磷脂酰肌醇-3激酶(PI3K),Bcl-2蛋白的表达(P0.05)。结论:10μmol·L-1槲皮素能有效减少H_2O_2介导的心肌细胞氧化损伤,进而抑制心肌细胞凋亡。该机制可能是通过调节NADPH氧化酶亚型NOX-4与p22phox,减少ROS生成,激活PI3K表达,升高Bcl-2实现。

关 键 词:槲皮素  H2O2  氧化应激  凋亡  细胞存活率  活性氧分子  还原型辅酶Ⅱ氧化酶-4
收稿时间:2016-02-17

Protective Mechanism of Quercetin on Oxidative Injury in H9C2 Cardiomyocytes
HUO Kui-yuan,CHANG Hong,WANG Yong,LI Chun and TANG Bing-hua. Protective Mechanism of Quercetin on Oxidative Injury in H9C2 Cardiomyocytes[J]. China Journal of Experimental Traditional Medical Formulae, 2016, 22(15): 122-127
Authors:HUO Kui-yuan  CHANG Hong  WANG Yong  LI Chun  TANG Bing-hua
Affiliation:School of Basic Medical Science, Beijing University of Chinese Medicine, Beijing 100029, China,School of Basic Medical Science, Beijing University of Chinese Medicine, Beijing 100029, China,School of Basic Medical Science, Beijing University of Chinese Medicine, Beijing 100029, China,School of Basic Medical Science, Beijing University of Chinese Medicine, Beijing 100029, China and School of Basic Medical Science, Beijing University of Chinese Medicine, Beijing 100029, China
Abstract:
Keywords:quercetin  H2O2  oxidative stress  apoptosis  survival rate  reactive oxygen species  NADPH oxidase-4
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