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人跨膜型TNF-α(TM-TNF-α)特异性单克隆抗体的制备、鉴定及功能初探
引用本文:柯杭君,喻明霞,王晶,石文芳,姜小丹,冯玮,李卓娅. 人跨膜型TNF-α(TM-TNF-α)特异性单克隆抗体的制备、鉴定及功能初探[J]. 中国免疫学杂志, 2007, 23(6): 488-491
作者姓名:柯杭君  喻明霞  王晶  石文芳  姜小丹  冯玮  李卓娅
作者单位:华中科技大学同济医学院基础医学院免疫学系,武汉,430030
摘    要:目的:制备TM-TNF-α特异性单克隆抗体,并进行鉴定和初步功能分析。方法:用表位预测软件选定TM-TNF-α特异的20个氨基酸多肽,偶联载体蛋白,免疫BALB/c小鼠;用杂交瘤技术制备单克隆抗体。采用ELISA、流式细胞术和Western blot鉴定单抗的特异性,观察单抗对Jurkat细胞在AICD模型中凋亡率的影响。结果:成功制备了6株抗TM-TNF-α的单克隆抗体。ELISA结果显示6株单抗均特异性结合免疫原多肽,与S-TNF-α等细胞因子无交叉反应;流式细胞术显示6株单抗均能结合细胞膜表面TM-TNF-α分子,并可区分人源和鼠源TM-TNF-α;Western blot结果证实6株单抗只能识别26kD的人TM-TNF-α,而不识别17kD的S-TNF-α。在AICD模型中,单克隆抗体不影响Jurkat细胞凋亡率。结论:成功制备了6株TM-TNF-α特异性单克隆抗体,且单抗不干扰TNF-α与TNFR结合,为进一步研究TM-TNF-α在相关疾病中的作用提供又一研究手段。

关 键 词:跨膜型TNF-α  单克隆抗体  杂交瘤技术
文章编号:1000-484X(2007)06-0488-04
修稿时间:2006-07-082006-11-07

Preparation and identification of transmembrane TNF-α(TM-TNF-α)specific monoclonal antibody
KE Hang-Jun,YU Ming-Xia,WANG Jing,SHI Wen-Fang,JIANG Xiao-Dan,FENG Wei,LI Zhuo-Ya. Preparation and identification of transmembrane TNF-α(TM-TNF-α)specific monoclonal antibody[J]. Chinese Journal of Immunology, 2007, 23(6): 488-491
Authors:KE Hang-Jun  YU Ming-Xia  WANG Jing  SHI Wen-Fang  JIANG Xiao-Dan  FENG Wei  LI Zhuo-Ya
Affiliation:Departmerit of Immunology, Schoool of Basic Medical Sciences, Tongji Medical College, Huazhong University of Science and Technology, Wuhan 430030, China
Abstract:
Keywords:
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