ER拮抗剂对Ishikawa细胞中p57~(kip2)、Cyclin D1表达及形态变化的影响研究 |
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引用本文: | 袁丹,刘俊江,周正平,刘蒙蒙.ER拮抗剂对Ishikawa细胞中p57~(kip2)、Cyclin D1表达及形态变化的影响研究[J].现代妇产科进展,2019(1). |
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作者姓名: | 袁丹 刘俊江 周正平 刘蒙蒙 |
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作者单位: | 遵义医学院病理学教研室;遵义医学院附属医院病理科;遵义医学院电镜室 |
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摘 要: | 目的:研究雌激素受体(ER)拮抗剂对人子宫内膜样癌(EC) Ishikawa细胞(高分化)形态变化及细胞中p57~(kip2)、Cyclin D1、CDK4表达情况的影响,探讨女性激素调控、细胞周期调控和EC发生、发展的影响。方法:分别用含雌二醇(E2)、他莫昔芬(TAM)、氟维司群(Faslodex,ICI182780)、E2+TAM、E2+ICI182780的培养基培养Ishikawa细胞,用不含药物的培养基作为对照。培养24、48、72、96h后,MTT法观察细胞增殖情况,培养24、48、72h后,通过光镜和电镜观察细胞的形态变化,Western blot法检测p57~(kip2)、Cyclin D1、CDK4蛋白表达。结果:MTT结果显示,与对照组比较,E2组、ICI182780组、E2+ICI182780组Ishikawa细胞增殖活性降低,以E2+ICI182780组更甚(P0.05);与E2组比较,E2+ICI182780组的细胞增殖活性降低(P0.05);实验组及对照组细胞的增殖活性均随着药物作用时间延长而增强(P0.05)。光镜下:与对照组比较,E2组、ICI182780组、E2+ICI182780组细胞密度降低,以E2+ICI182780组更甚,TAM组则稍增加;与E2组比较,E2+ICI182780组细胞密度降低,E2+TAM组则增加;各组细胞形态变化均不明显。电镜下:与对照组比较,E2组部分细胞可见内质网、线粒体明显肿胀,其余各组内质网呈不同程度肿胀,可见凋亡现象;与E2组比较,TAM组、ICI182780组内质网肿胀较轻,E2+TAM、E2+ICI182780组肿胀明显。Western blot结果示:与对照组比较,随着药物作用时间延长,p57~(kip2)蛋白在E2组、ICI182780组、E2+ICI182780组表达逐渐增加,其中E2+ICI182780组表达最高(P 0. 05); Cyclin D1、CDK4蛋白则在E2组、ICI182780组、E2+ICI182780组表达逐渐降低,其中E2+ICI182780组表达最低(P 0. 05);与E2组比较,p57~(kip2)蛋白在E2+ICI182780组表达增加,在E2+TAM组表达降低(P0.05); Cyclin D1、CDK4蛋白在E2+ICI182780组表达降低,在E2+TAM组表达增加(P0.05)。结论:ER拮抗剂ICI182780单独或联合使用雌激素,可能通过诱导p57~(kip2)蛋白表达,下调Cyclin D1、CDK4蛋白表达,达到阻碍细胞周期进程,抑制Ishikawa细胞增殖的作用,且对细胞损伤较重; TAM单独或联合应用雌激素,可能通过上调Cyclin D1、CDK4蛋白表达,下调p57~(kip2)蛋白表达,对Ishikawa细胞产生较弱的促增殖作用,从而发挥TAM的弱雌激素样作用。ICI182780可能比TAM更适合用于EC患者的内分泌治疗,这为EC内分泌治疗药物的选择提供了一定的实验依据。
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关 键 词: | 子宫内膜癌 ER拮抗剂 p57kip2 CyclinD1 CDK4 |
Effects of ER antagonists on the expression of p57~(kip2),Cyclin D1 and morphological changes in Ishikawa cells |
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