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光损伤鼠视网膜片培养上清液诱导MSCs分化为视网膜样细胞的研究
引用本文:白月,徐国兴.光损伤鼠视网膜片培养上清液诱导MSCs分化为视网膜样细胞的研究[J].国际眼科杂志,2014,14(3):394-398.
作者姓名:白月  徐国兴
作者单位:中国福建省福州市,福建医科大学附属第一医院 福建省眼科研究所;中国福建省福州市,福建医科大学附属第一医院 福建省眼科研究所
基金项目:国家自然科学基金课题(No.81070715); 中国卫生部科研基金课题(No.WKJ2008-2-61); 福建省创新平台基金课题(No.2010Y2003)
摘    要:目的:应用大鼠视网膜片光损伤后的培养上清液,在体外诱导大鼠骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)成为视网膜样细胞的可能性。

方法:贴壁筛选法分离、培养大鼠MSCs,流式细胞仪对其细胞纯度鉴定。取材大鼠视网膜神经上皮层作为视网膜片,常规石蜡切片HE染色鉴定各层组织完整性。电镜观察大鼠视网膜片光损伤程度。制备3种诱导分化大鼠MSCs的条件培养液。3种条件培养液均培养诱导至第3代大鼠MSCs 7~8d,用RT-PCR检测视紫红质(Rhodopsin)、神经元特异性烯醇化酶(neuron-specific enolase,NSE)、胶质纤维酸性蛋白(glial fibrillary acidic protein,GFAP)等视网膜细胞标志物在诱导后细胞中的表达情况。

结果:HE染色显示大鼠视网膜片取材结构完整,电镜显示大鼠视网膜片光损伤后结构损伤严重。RT-PCR鉴定:条件培养液诱导大鼠MSCs 7~8d,条件培养液Ⅰ组Rhodopsin(0.3915±0.00644)、NSE(0.2019±0.00682)、GFAP(0.1972±0.00211),条件培养液Ⅱ组Rhodopsin(0.0983±0.00319)、NSE(0.1048±0.00323)、GFAP(0.1040±0.00254),条件培养液Ⅲ组Rhodopsin(0.0044±0.00126)、NSE(0.0498±0.00149)、GFAP(0.0467±0.00333),组间差异有统计学意义。

结论:光损伤大鼠视网膜片培养上清液可诱导大鼠MSCs分化为视网膜样细胞,为干细胞治疗视网膜变性疾病提供新思路。

关 键 词:MSCs    视网膜样细胞    光损伤    分化
收稿时间:2013/11/18 0:00:00
修稿时间:2014/1/28 0:00:00

In vitro differentiation of MSCs into retina-like cells by the supernatant fluid of light-injured neurosensory retina
Yue Bai and Guo-Xing Xu.In vitro differentiation of MSCs into retina-like cells by the supernatant fluid of light-injured neurosensory retina[J].International Journal of Ophthalmology,2014,14(3):394-398.
Authors:Yue Bai and Guo-Xing Xu
Institution:Fujian Institute of Ophthalmology; the First Affiliated Hospital of Fujian Medical University, Fuzhou 350001, Fujian Province, China;Fujian Institute of Ophthalmology; the First Affiliated Hospital of Fujian Medical University, Fuzhou 350001, Fujian Province, China
Abstract:
Keywords:mesenchymal stem cells  retina-like cells  light injury  differentiation
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