| 镰形扇头蜱半饱血雌蜱cDNA文库的构建 |
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| 引用本文： | 龚海燕,周金林,周勇志,张维谊.镰形扇头蜱半饱血雌蜱cDNA文库的构建[J].中国人兽共患病杂志,2004,20(6):485-488. |
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| 作者姓名： | 龚海燕 周金林 周勇志 张维谊 |
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| 作者单位： | 中国农科院上海家畜寄生虫病研究所,中国农科院上海家畜寄生虫病研究所,中国农科院上海家畜寄生虫病研究所,中国农科院上海家畜寄生虫病研究所 农业部动物寄生虫学重点开放实验室,上海 200232
,农业部动物寄生虫学重点开放实验室,上海 200232
,农业部动物寄生虫学重点开放实验室,上海 200232
,农业部动物寄生虫学重点开放实验室,上海 200232 |
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| 基金项目： | 基础研究重大项目前期研究专项基金(No.2001CCA00900) |
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| 摘 要： | 目的 为了筛选抗蜱及蜱传疾病基因工程疫苗的抗原候选分子,构建了镰形扇头蜱半饱血雌蜱cDNA表达文库。方法 用Frizol试剂提取镰形扇头蜱半饱血雌蜱总RNA,经反转录合成cDNA第一链,应用长链PCR(LD-PCR)扩增方法,合成双链cDNA。双链cDNA(ds cDNA)在Sfi I内切酶的作用下,形成两端分别带有Sfi I A和Sfi I B的粘性末端。经CHROMA SPIN-400柱纯化,收集500bp以上的双链cDNA片段,将其连接于带有Sfi工A和Sfl I B末端的λTriplEx2噬菌体载体,经体外包装后,以XL1-Blue为受体菌构建cDNA噬菌体表达文库。结果 经测定,库容量为4.2×106,重组率为96％。扩增后的文库滴度为2.04×1010pfu/ml。通过对文库中随机挑选的15个克隆进行序列分析,获得一个编码线粒体ATP酶第6亚基蛋白的全长cDNA序列。结论 结果显示,镰形扇头蜱半饱血雌蜱cDNA表达文库已构建成功。
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| 关 键 词： | 镰形扇头蜱 半饱血雌蜱 cDNA文库 |
| 文章编号： | 1002-2694(2004)06-0485-04 |
| 收稿时间： | 2004-06-20 |
| 修稿时间： | 2003年7月17日 |
Construction of cDNA library from feeding female Rhipicephalus haemaphysaloides haemaphysaloides |
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| GONG Hai-yan,ZHOU Jin-lin,ZHOU Yong-zhi,ZHANG Wei-yi.Construction of cDNA library from feeding female Rhipicephalus haemaphysaloides haemaphysaloides[J].Chinese Journal of Zoonoses,2004,20(6):485-488. |
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| Authors: | GONG Hai-yan ZHOU Jin-lin ZHOU Yong-zhi ZHANG Wei-yi |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Rhipicephalus haemaphysaloides haemaphysaloides feeding female tick cDNA library |
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