| 旋毛虫Ts87基因在大肠杆菌中的表达及表达产物的纯化 |
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| 引用本文： | 杨静,诸欣平,杨雅平,詹斌,冯建军,Hotez Peter. 旋毛虫Ts87基因在大肠杆菌中的表达及表达产物的纯化[J]. 中国人兽共患病杂志, 2003, 19(3): 25-27,40 |
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| 作者姓名： | 杨静 诸欣平 杨雅平 詹斌 冯建军 Hotez Peter |
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| 作者单位： | [1]首都医科大学基础医学院寄生虫学教研室，北京100054 [2]美国乔治华盛顿大学微生物与热带医学系 |
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| 基金项目： | 美国中华医学会 (CMB) (Parasitology 98-674)，国家留学基金回国科研资助 (1998-2 0 0 1)，北京市教委科技发展基金 (2 0 0 1-2 0 0 4)，北京市跨世纪优秀人材工程 (2 0 0 1-2 0 0 3 )资助项目 |
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| 摘 要： | 目的 为进一步研究和应用旋毛虫Ts87基因，本文原核表达了PET-28a( )／Ts87重组质粒，并纯化鉴定了该蛋白。方法 将Ts87基因片段克隆入原核表达载体PET-28a( )，形成重组质粒PET-28a( )／Ts87，转化后经IPTG诱导得到表达蛋白(约40kDa)，利用固定化金属离子(Ni^2 )配体亲和层析纯化目的蛋白，进行复性，并用兔人工感染旋毛虫血清鉴定表达产物。结果与结论 成功构建了PET-28a( )／Ts87，SDS-PAGE显示融合蛋白主要以包涵体形式存在，经过亲和层析得到纯化的目的蛋白，经鉴定可被人工感染旋毛虫兔血清识别。
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| 关 键 词： | 旋毛虫 Ts87基因 大肠杆菌 表达 表达产物 纯化 |
| 文章编号： | 1002-2694(2003)03-0025-04 |
Expression and purification of Ts87 gene of Trichinella spiralis |
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| Hotez Peter. Expression and purification of Ts87 gene of Trichinella spiralis[J]. Chinese Journal of Zoonoses, 2003, 19(3): 25-27,40 |
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| Authors: | Hotez Peter |
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| Abstract: | Aim To establish a expression purification procedure for Ts87 gene in vitro Methods After centrifugation of the bacterial culture,the bacterial pellet was resuspended and lysed by ultrasonication Immobilized metal (Ni 2+ ) chelation affinity chromatography was used to purify the fusion protein PET-28a(+)/Ts87 from the inclusion bodies Results and Conclusion The SDS-PAGE analysis showed that the fusion protein was stayed as inclusion bodies The target protein was purified by affinity chromatography The purified fusion protein could react with Trichinella spiralis infected rabbit sera by Western blot |
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| Keywords: | Trichinella spiralis Fusion protein Purification Expression Affinity chromatography |
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