扶正化瘀方对非酒精性脂肪性肝纤维化及uPA/PAI-1的作用及机制

目的探明非酒精性脂肪性肝纤维化进展中扶正化瘀方对小鼠肝组织uPA/PAI-1表达的影响及作用机制。方法选用7～8周龄健康雄性C57BL/6J小鼠,蛋氨酸-胆碱缺乏(methionine and choline deficient,MCD)饮食喂养8周,建立非酒精性脂肪性肝纤维化模型,采用扶正化瘀方进行干预实验,蛋氨酸-胆碱充足饮食设立对照组。HE、Masson染色观察肝脂肪变、炎性反应及纤维化程度;RT-PCR和Western印迹检测肝组织纤溶酶原激活物抑制因子-1(plasminogen activator inhibitor-1,PAI-1)、尿激酶型纤溶酶原激活物(urokinase type plasminogen activator,uPA)、转化生长因子β1(transforming growth factor beta1,TGF-β1)mRNA及蛋白的表达。多组间比较采用单因素方差分析,组间比较采用Student-Newman-Keuls法。结果模型组小鼠肝组织呈现大泡性肝细胞脂肪变,伴肝细胞气球样变、小叶内点/灶状坏死及炎性细胞浸润、可见窦周纤维化及纤维间隔形成,肝组织PAI-1、uPA、TGF-β1mRNA及蛋白表达水平较对照组显著升高;应用扶正化瘀方组小鼠肝脂肪变、炎性反应及纤维化程度较模型组明显减轻,PAI-1、TGF-β1mRNA及蛋白表达显著减少(P<0.05),而uPA表达显著增多(P<0.05)。对照组、模型组、扶正化瘀方组上述基因mRNA及蛋白表达水平依次为,PAI-1:0.25±0.02、1.43±0.10、0.84±0.16和0.30±0.08、1.40±0.16、0.90±0.17;uPA:0.42±0.02、1.03±0.13、1.22±0.06和0.34±0.08、1.15±0.07、1.44±0.07;TGF-β1:0.54±0.06、1.17±0.06、1.02±0.07和0.37±0.07、1.43±0.13、0.99±0.13(P<0.05)。结论扶正化瘀方可通过上调uPA、下调PAI-1及TGF-β1表达,阻止小鼠非酒精性脂肪性肝纤维化的发生与发展。