HGV E1区5′端基因的克隆、序列分析及表达

通过ＲＴ－ＰＣＲ从庚型肝炎患者血清中扩增出庚型肝炎病毒Ｅ１区５′端基因Ｅｐ，经限制性内切酶消化后克隆入ｐＵＣ１９质粒中。序列分析结果表明，该基因与中国河北株相关基因核苷酸的同源性为９２％。将该基因亚克隆入原核表达载体ｐＥＸ３１ｂ中，成功地构建了ｐＥＸ３１ｂ－Ｅｐ重组质粒，经４２℃诱导表达，在Ｍｒ２００００处可见一条明显的表达带，表达产物约占总菌体蛋白的８％。经蛋白铜染洗脱法纯化蛋白，ＥＬＩＳＡ检测表明，该蛋白具有抗原性。