| 人组织因子途径抑制物腺病毒表达系统的构建及体内表达 |
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| 引用本文： | 邹亚男,李天发,聂宏刚,张瑶,尹新华,关振中,于波. 人组织因子途径抑制物腺病毒表达系统的构建及体内表达[J]. 中国地方病学杂志, 2005, 24(5): 575-578 |
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| 作者姓名： | 邹亚男 李天发 聂宏刚 张瑶 尹新华 关振中 于波 |
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| 作者单位： | 150086,哈尔滨医科大学附属第二医院心内科 |
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| 基金项目： | 国家“863”课题资助项目(2004AA2Z3761)，黑龙江省自然基金资助项目(D00-20) |
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| 摘 要： | 目的构建携载人组织因子途径抑制物(tissuefactorpathwayinhibitor,TFPI)基因的重组腺病毒载体,为基因治疗提供实验基础。方法利用基因重组技术,将人TFPI基因连接到穿梭质粒pDC316中,然后将腺病毒骨架质粒pBHGlox△E1,3Cre以及重组穿梭质粒pDC316-TFPI共转染293细胞,并在其中发生Cre重组酶介导的位点,特异性重组及腺病毒包装,扩增后进行滴度测定。将包装成功的携带人TFPI基因的重组腺病毒(Ad-TFPI)转染兔颈动脉,并用携带LacZ报告基因的重组腺病毒(Ad-LacZ)作为对照,3d后RT-PCR、ELISA法检测人TFPImRNA、蛋白的表达。结果得到了携带人TFPI基因的重组腺病毒,包装的病毒蚀斑形成单位(plaqueformationunit,PFU)滴度为7.6×1012/L。在Ad-TFPI转染兔颈动脉后3d,RT-PCR法和ELISA法均检测出TFPI表达,Ad-LacZ转染后未测到人TFPI的表达。结论成功构建了人TFPI腺病毒表达载体,为下一步的基因治疗提供了基础。
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| 关 键 词： | 组织因子途径抑制物 腺病毒 基因疗法 |
| 文章编号： | 1000-4955（2005）05-0575-04 |
| 收稿时间： | 2005-03-31 |
| 修稿时间： | 2005-03-31 |
The construction of adenovirus vector carrying human tissue factor pathway inhibitor gene and its expression in vivo |
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| ZOU Ya-nan,LI Tian-fa,NIE Hong-gang,Zhang Yao,YIN Xin-hua,GUAN Zhen-zhong,YU Bo. The construction of adenovirus vector carrying human tissue factor pathway inhibitor gene and its expression in vivo[J]. Chinese Jouranl of Endemiology, 2005, 24(5): 575-578 |
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| Authors: | ZOU Ya-nan LI Tian-fa NIE Hong-gang Zhang Yao YIN Xin-hua GUAN Zhen-zhong YU Bo |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Tissue factor pathway inhibitor Adenovirus Gene therapy |
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