| 高滴度表达抑制转录因子的重组腺相关病毒的制备 |
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| 引用本文： | 王桂芳,杨丹榕,修清玉,施柯,吴丹,黎怀星,孙树汉.高滴度表达抑制转录因子的重组腺相关病毒的制备[J].上海医学,2004,27(12):898-901,F005. |
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| 作者姓名： | 王桂芳 杨丹榕 修清玉 施柯 吴丹 黎怀星 孙树汉 |
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| 作者单位： | 1. 200003,上海,第二军医大学长征医院呼吸内科
2. 第二军医大学医学遗传教研室 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金资助项目 (3 0 170 40 6) |
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| 摘 要： | 目的 获得表达小鼠抑制转录因子ROG(repressor of GATA-3)基因；构建表达ROG的重组腺相关病毒载体，制备腺相关病毒。方法 设计、合成引物，通过逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)从CTLL-2细胞总RNA中扩增ROG基因，测序成功后，最终连接于pAAV-MCS，双酶切、PCR鉴定阳性重组质粒，并在Hela细胞中表达；制备高滴度重组腺相关病毒。结果 成功扩增了小鼠ROG基因，构建表达ROG基因的重组腺相关病毒表达载体，并成功表达于Hela细胞。结论 本实验构建的小鼠ROG重组腺相关病毒将为哮喘的基因治疗研究奠定物质基础。
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| 关 键 词： | 重组腺相关病毒 表达载体 小鼠 基因 转录因子 Hela细胞 高滴度 酶切 测序 总RNA |
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