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| 产单核李斯特菌的改良分子信标荧光PCR-磁捕获快速检测体系的建立 | |
| 引用本文： | 王冰,扈庆华,石晓路,李庆阁,郑琳琳,林一曼,段永翔.产单核李斯特菌的改良分子信标荧光PCR-磁捕获快速检测体系的建立[J].现代预防医学,2009,36(13). |
| 作者姓名： | 王冰 扈庆华 石晓路 李庆阁 郑琳琳 林一曼 段永翔 |
| 作者单位： | 1. 深圳市疾病预防控制中心,深圳,518020 2. 厦门大学生命科学学院 3. 深圳市南山区疾病预防控制中心 |
| 基金项目： | 国家自然科学基金，广东省卫生厅资助项目，深圳市科技局资助项目 |
| 摘 要： | 目的]建立改良分子信标荧光PCR-磁捕获快速检测产单核李斯特菌(LMO)的体系,应用于食品中LMO的污染状况调查及食物中毒快速诊断. 方法]根据GenBank公布的LMO hlyA基因的保守序列,设计引物和改良分子信标探针,建立改良分子信标荧光PCR检测体系.运用磁捕获材料对PCR检测阳性的增菌液进一步处理后划平皿做分离培养. 结果]改良分子信标-实时PCR反应体系DNA灵敏度为110 fg,菌液灵敏度为99 cfu/ml或4 cfu/PCR反应体系,无交叉反应.以此反应体系检测28株LMO,均出现特异的荧光信号.对228份食品进行LMO检测,8份增菌液LMO实时荧光PCR阳性.用磁捕获材料处理此8份增菌液,全部细菌培养阳性,高于国标法的6份阳性.结论]改良分子信标一实时PCR反应体系快速、灵敏度高,特异性强,运用磁捕获试剂能有效提高培养阳性率.应用该检测系统能提高LMO的检出率和准确性.该系统可应用于LMO食品污染状况调查及食物中毒的快速诊断. |
| 关 键 词： | 产单核李斯特菌 改良分子信标 实时PCR 检测 免疫磁珠捕获 |
ESTABLISHMENT OF RAPID DETECTION SYSTEM OF LISTERIA MONOCYTOGENES WITH MODIFIED MOLECULAR BEACONS PCR_IMMUNOMAGNETIC BEADS CAPTURE |
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| Abstract: | |
| Keywords: | |
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