| Ezrin在UMR 106骨肉瘤细胞株移植瘤成瘤及肺转移中的作用 |
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| 引用本文： | 王忠良,李旭良,张德文,李明,覃佳强,刘传康,刘星,曹豫江.Ezrin在UMR 106骨肉瘤细胞株移植瘤成瘤及肺转移中的作用[J].第三军医大学学报,2009,31(2). |
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| 作者姓名： | 王忠良 李旭良 张德文 李明 覃佳强 刘传康 刘星 曹豫江 |
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| 作者单位： | 1. 重庆医科大学附属儿童医院矫形外科,重庆,400014
2. 重庆医科大学附属儿童医院泌尿外科,重庆,400014 |
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| 摘 要： | 目的 探讨膜一细胞骨架联接蛋白Ezrin埘骨肉瘤细胞株UMR106成瘤及转移能力的影响.方法 为获得较好的干扰效果,针对大鼠Villin2基因(Ezrin编码基因)没计2个发夹式RNA(shRNA).合成后克隆入载体pGenSil-1,扩增并中量提取质粒,应用脂质体LipofectamineTM2000转染进UMR106细胞.采用逆转录聚介酶链反应(RT-PCR)和West-ern印迹检测Ezrin的表达.选取效果最好的shRNA转染UMR106细胞并行G418筛选,传代扩增.扩增后细胞原位接种到SD大鼠胫骨结节,并设立正常细胞组和阴性对照组,观察记录肿瘤彤成和大鼠存活时间,计数肺表面转移灶数目,镜检定位增强型绿色荧光蛋白(enhanced green fluorescence protein,EGFP)在原发灶和肺转移灶内的表达.结果 ①shRNAI干扰作用最明显,下调达90%.②移植时稳定转染细胞数约50%.③实验组与对照组均100%成瘤,成瘤时间正常细胞组为(10.25±1.07)d,阴性对照组为(10.08 ±0.88)d,实验组为(10.30±1.08)d,三者间没有明显差别(P＞0.05);实验组存活时间(42.30±17.25)d明显长于正常细胞组(20.60±11.70)d(P＜0.01)和阴性对照组(22.40±7.42)d(P＜0.01);实验组肺转移灶数目明显低于正常细胞组(P＜0.01)和阴性财照组(P＜0.01),分别为(39.40±51.86)个、(124.60 ±39.78)个和(117.60±36.48)个;阴件对照组中原发灶和肺转移灶内均有EGFP表达,而实验组肺转移灶内末见EGFP表达.结论 Ezrin蛋白是骨肉瘤肺转移中的一个关键因子,干扰Ezrin蛋白表达能抑制其肺转移的发生,可以作为预防肺转移的靶点.
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| 关 键 词： | Ezrin蛋门 原位移植 RNA干扰 肺转移 |
Role of Ezrin in tumor formation and pulmonary metastasis in rats after orthotopic transplantation of osteosarcoma cell strain UMR106 |
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| WANG Zhong-liang,LI Xu-liang,ZHANG De-wen,LI Ming,QIN Jia-qiang,LIU Chuan-kang,LIU Xing,CAO Yu-jiang.Role of Ezrin in tumor formation and pulmonary metastasis in rats after orthotopic transplantation of osteosarcoma cell strain UMR106[J].Acta Academiae Medicinae Militaris Tertiae,2009,31(2). |
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| Authors: | WANG Zhong-liang LI Xu-liang ZHANG De-wen LI Ming QIN Jia-qiang LIU Chuan-kang LIU Xing CAO Yu-jiang |
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| Institution: | WANG Zhong-liang1,LI Xu-liang2,ZHANG De-wen1,LI Ming1,QIN Jia-qiang1,LIU Chuan-kang1,LIU Xing1,CAO Yu-jiang1(1Department of Orthopedic Surgery,2Department of Urinary Surgery,Children's Hospital,Chongqing Medical University,Chongqing 400014,China) |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Ezrin orthotopic transplantation RNA interference pulmonary metastasis |
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