| 蚓激酶的提取纯化及性质研究 |
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| 引用本文： | 周海,王春维,张怡,刘翼. 蚓激酶的提取纯化及性质研究[J]. 中国生化药物杂志, 2011, 32(3) |
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| 作者姓名： | 周海 王春维 张怡 刘翼 |
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| 作者单位： | 武汉市畜禽饲料工程技术研究中心,武汉工业学院,湖北武汉430023 |
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| 基金项目： | 武汉工业学院研究生教育创新计划 |
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| 摘 要： | 目的建立高效的蚓激酶纯化工艺,并研究其酶学性质。方法以赤子爱胜蚓(Eisenia foelide)为原料,经过匀浆抽提、硫酸铵分段盐析、色谱分离、电泳等技术对蚓激酶进行分离纯化及鉴定,并研究pH、温度、金属离子与抑制剂对蚓激酶活性的影响以及蚓激酶的作用机理。结果纯化蚓激酶比活达5 100 U/mg,经SDS-PAGE电泳分析得2条带,相对分子质量为32 000和33 500;体外溶栓实验表明,蚓激酶具有直接溶解纤维蛋白和激活纤溶酶原的双重作用。在中性和略偏碱性环境中稳定且活性高;温度适应范围广;不同种类及浓度的金属离子对蚓激酶活性的影响不尽相同;抑制因子及底物特异性研究发现,蚓激酶属于丝氨酸蛋白酶,不属于金属蛋白酶,同时含有二硫键。结论该分离方法可以得到较纯的蚓激酶。
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| 关 键 词： | 蚓激酶 纯化 色谱 酶学性质 |
Purification and characterization of lumbrokinas |
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| ZHOU Hai,WANG Chun-wei,ZHANG Yi,LIU Yi. Purification and characterization of lumbrokinas[J]. Chinese Journal of Biochemical Pharmaceutics, 2011, 32(3) |
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| Authors: | ZHOU Hai WANG Chun-wei ZHANG Yi LIU Yi |
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| Affiliation: | ZHOU Hai,WANG Chun-wei,ZHANG Yi,LIU Yi(Wuhan Livestock Feed Engineening Technology Research Center,Wuhan Polytechnic University,Wuhan 430023,China) |
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| Abstract: | Purpose To establish an effective method of purifying lumbrokinas(LK) and to study the characteristics.Methods LK was purified through extraction,(NH4) 2SO4 fractional salting out,Sephadex G-75,DEAE-Sepharose 6 Fast Flow and Phenyl Sepharose High Performance from earthworm Eisenia foelide and identified by SDS-PAGE.Effects of pH value,temperature and inhibitions on the activity of LK and the mechanism of LK were studied.Results The specific activity of LK amounts to 5 100 U/ mg.Two fractions of LK,with Mr o... |
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| Keywords: | lumbrokinas purification chromatography enzyme characteristics |
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