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腺病毒载体介导的大鼠DNA多聚酶β重组体的构建及其在PC12细胞中的表达
引用本文:钟建辉,银巍,藏林泉,江伟健,邱鹏新,颜光美.腺病毒载体介导的大鼠DNA多聚酶β重组体的构建及其在PC12细胞中的表达[J].中山大学学报(医学科学版),2005,26(6):622-625.
作者姓名:钟建辉  银巍  藏林泉  江伟健  邱鹏新  颜光美
作者单位:1. 中山大学,基础医学院药理教研室,广东,广州,510080;中山大学,附属第一医院肾内科,广东,广州,510080
2. 中山大学,基础医学院药理教研室,广东,广州,510080
基金项目:中国科学院资助项目,广东省自然科学基金
摘    要:目的]为探讨DNA多聚酶β在神经细胞损伤中的作用与机制,构建其重组腺病毒载体,并在PC12细胞中表达.方法]RT-PCR获取大鼠DNA多聚酶β(POLβ)的编码序列,TA克隆测序,酶切POLβ基因并连入穿梭质粒pAdTrack-CMV,电转至含腺病毒pAdeasy骨架质粒的大肠杆菌BJ5183.重组腺病毒质粒(pAd-polβ)和Lipofectamine2000转染293细胞,用重组腺病毒感染PC12细胞.结果]10个TA克隆中有3个克隆的序列与GENE BANK中大鼠POLβ cDNA序列完全一致,同源重组检测时30个克隆中有8个含目标条带.DNA序列正确的POLβ重组腺病毒质粒转染293细胞后,感染Ad-polβ的293及PC12细胞荧光显微镜下可见绿色荧光,重组腺病毒Ad-polβPCR鉴定含目标条带,Ad-polβ感染PC12细胞Western Blot检测到POLβ蛋白表达.结论]成功构建了大鼠DNA多聚酶β的腺病毒重组体并在PC12细胞中表达

关 键 词:DNA多聚酶β  腺病毒载体  PC12细胞
文章编号:1672-3554(2005)06-0622-04
修稿时间:2005年6月28日

Construction of Recombinant Adenovirus Containing Rat DNA Polymerase β and Its Expression in PC12 Cells
ZHONG Jian-hui,YIN Wei,ZANG Lin-quan,JIANG Wei-jian,QIU Peng-xin,YAN Guang-mei.Construction of Recombinant Adenovirus Containing Rat DNA Polymerase β and Its Expression in PC12 Cells[J].Journal of Sun Yatsen University(Medical Sciences),2005,26(6):622-625.
Authors:ZHONG Jian-hui  YIN Wei  ZANG Lin-quan  JIANG Wei-jian  QIU Peng-xin  YAN Guang-mei
Abstract:
Keywords:
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