电针曲池穴及足三里穴对脑缺血再灌注损伤大鼠神经细胞线粒体凋亡途径的影响

目的观察电针干预对脑缺血再灌注损伤大鼠神经细胞线粒体凋亡途径的影响。 方法选取SD大鼠60只，按照随机数字表法将其分为假手术组、模型组和电针组，每组20只。模型组、电针组大鼠采用Zea Longa线栓法制备大脑中动脉闭塞（MCAO）模型，缺血2h后，再灌注3d。模型组与电针组各有18只大鼠造模成功。术后2h，在电针组大鼠“曲池”、“足三里”穴进行电针治疗，假手术组及模型组不作特殊干预。采用Zea Longa 5分评价法观察大鼠神经功能缺损的恢复程度；用2,3,5-氯化三苯基四氮唑染色，计算脑梗死体积；应用TUNEL试剂盒检测皮质区缺血周围神经细胞的凋亡情况；采用Western blot法、免疫组织化学法和逆转录-聚合酶链式反应（RT-PCR）检测脑组织中B淋巴细胞瘤-2基因（Bcl-2）、Bax蛋白、胱天蛋白酶（caspase）的表达水平。 结果与组内术后2h、1d及2d比较，模型组［（1.67±0.58）分］、电针组［（1.14±0.37）分］术后3d时的神经功能缺损评分较低（P<0.05）。与假手术组同时间点比较，模型组、电针组大鼠术后2h、1d、2d及3d的神经功能缺损评分均较高，电针组术后2d及3d神经功能缺损评分低于模型组（P<0.05）。术后3d，电针组大鼠脑梗死体积百分比明显减小（P<0.05）。假手术组、模型组、电针组大鼠大脑皮质缺血半暗带区神经细胞的凋亡百分比分别为（1.07±0.02）%、（39.4±10.1）%、（15.1±4.2）%。与模型组比较，电针组凋亡细胞数量百分比明显较低（P<0.05）。术后3d，模型组大鼠大脑皮质Bcl-2蛋白（0.11±0.02）、mRNA的相对含量（0.13±0.04）较假手术组明显下降（P<0.05），与模型组比较，电针组Bcl-2蛋白（0.36±0.11）、mRNA的相对含量（0.41±0.15）较高（P<0.05）。术后3d，模型组、电针组大鼠大脑皮质Bax蛋白、mRNA的相对含量均高于假手术组（P<0.05），与模型组比较，电针组大鼠大脑皮质Bax蛋白（0.51±0.14）、mRNA的相对含量（0.37±0.13）较高（P<0.05）。术后3d，电针组活化型胱天蛋白酶-3（cleaved caspase-3）免疫阳性细胞明显少于模型组，差异有统计学意义（P<0.05）。 结论电针刺激“曲池”及“足三里”穴对脑缺血再灌注损伤大鼠的神经细胞具有保护作用，其机制可能与调控线粒体凋亡途径蛋白的表达水平有关。