人副流感病毒HPIV多重RT—PCR快速检测方法的建立 |
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引用本文: | 吴德,邹丽容,莫艳玲,李晖,陈秋霞,黄平,方苓,柯昌文.人副流感病毒HPIV多重RT—PCR快速检测方法的建立[J].广东卫生防疫,2008(1):18-21. |
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作者姓名: | 吴德 邹丽容 莫艳玲 李晖 陈秋霞 黄平 方苓 柯昌文 |
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作者单位: | 广东省疾病预防控制中心,广东广州510300 |
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基金项目: | 新发和再发传染病病原学监测(WHO合作项目,2007.02.02.AW.01),呼吸道未知病毒的筛查及鉴定方法研究(20078031507002) |
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摘 要: | 目的建立快速检测人副流感病毒的多重PCR方法。方法通过查阅文献获取副流感病毒的PCR引物序列,并利用分子生物学软件对其进行评估,同时设计合成半巢式PCR引物。提取分离病毒的总RNA,以RNA抽提物为模板,一步法一次反转录扩增HPIV-1,2,3,4等4种型别的副流感病毒。以多重RT—PCR产物作为模板,用半巢式PCR进一步扩增确认。结果利用多重RT—PCR方法一次扩增出人副流感病毒的4个不同型别,条带大小分别是317、507、189和451bp,与目的片段大小一致;半巢式PCR扩增出相应的特异条带,条带大小分别是261、340、145和390bp,扩增结果与目的片段大小一致。结论人副流感病毒多重RT—PCR快速检测方法已初步建立。
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关 键 词: | 人副流感病毒 多重RT—PCR |
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