高效液相色谱-串联质谱法同时测定大鼠血浆中7种B族维生素的含量

目的 建立同时测定大鼠血浆中7种B族维生素(VB)的高效液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)分析方法。方法 血浆样品前处理采用沉淀蛋白法；色谱分离采用Agilent ZORBAX SB-Aq column(2.1 mm×150 mm, 3.5μm),流动相为0.01%甲酸(A)-甲醇(B),梯度洗脱，流速0.3 mL·min^-1,柱温30℃;质谱检测采用正离子模式多反应监测，以2,4,5,6-氘代烟酰胺为内标。结果 方法学验证结果显示，7种VB的最低定量限为7.5～300 ng·mL^-1,最高定量限为1 000～20 000 ng·mL^-1,在一定浓度范围内线性关系良好(r²>0.992 2);准确度86.0%～117.6%,批内和批间精密度均<20%。此外，各分析物的提取回收率均>86.1%,无明显基质效应且稳定性良好。运用所建立的分析方法成功测定了SD大鼠单次灌胃复合VB溶液后的血药浓度。结论 建立的分析方法简便快捷、灵敏度高、专属性强，适用于真实血浆中VB的同时测定，为深入...