人TGFβ1cDNA高表达重组质粒的构建

目的为了得到基因工程制备的人重组TGFβ1，构建人TGFβ；cDNA高表达重组质粒。方法从人血小板中提取总RNA，经RT－PCR得到TGFβ；cDNA基因，并克隆到表达质粒pBLMVL2中，构建了在PL启动控制基因表达质粒pBLMVL2－TGFβ；，使其在大肠杆菌中进行温敏诱导表达。结果RT－PCR得到的TGFβcDNA经DNA序列分析与文献报道一致，pBLMVL2－TGFβ1在大肠杆菌中表达产物人重组TGFβ1经还原型SDS－PAGE电泳，呈一条蛋白条带，分子量12．5kd，表达产物约占全菌蛋白20％。结论构建的重组质粒pBLMVL2－TGFβ1能高表达人重组TGFβ1。