| 表达幽门螺杆菌hpaA基因的减毒鼠伤寒沙门氏菌对小鼠的免疫保护作用 |
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| 引用本文： | 朱森林,陈湖,陈洁,李国庆,胡品津,彭晓忠.表达幽门螺杆菌hpaA基因的减毒鼠伤寒沙门氏菌对小鼠的免疫保护作用[J].中国人兽共患病杂志,2002,18(2):32-36. |
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| 作者姓名： | 朱森林 陈湖 陈洁 李国庆 胡品津 彭晓忠 |
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| 作者单位： | 中山医科大学附属第一医院 广州510080
(朱森林，陈旻湖，陈洁，李国庆，胡品津)，中山医科大学附属第一医院 广州510080(彭晓忠) |
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| 基金项目： | 卫生部临床学科重点项目 (No 970 40 2 2 6)，广东省科技计划重点攻关项目 (No 99M0 480 2G)，广东省自然科学基金课题 (No 990 0 77)，广东省高教厅“千百十工程”优秀人才基金 (No 2 0 0 0 -0 8) |
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| 摘 要： | 目的 克隆幽门螺杆菌 (H pylori)全长hpaA基因 ,构建表达HpaA蛋白的重组减毒鼠伤寒沙门氏菌 ,并研究其对小鼠的免疫保护作用。方法 用PCR扩增全长hpaA基因 ,经适当的酶切 -连接反应将其连入原核表达质粒 pTrc99A ,并进行了基因测序。重组质粒经鉴定后再导入减毒鼠伤寒沙门氏菌SL32 6 1,提取重组菌质粒 ,PCR和酶切鉴定 ,筛选阳性克隆。用SDS -PAGE电泳和Westernblot进行HpaA表达分析和鉴定 ,用薄层扫描分析HpaA含量。重组菌 3× 10 8CFU/ 0 4ml/只免疫C5 7BL/ 6小鼠 ,4周后H pyloriSS110 5CFU/只攻击小鼠 ,再 5周后处死小鼠 ,取腺胃做快速尿素酶试验和Giemsa染色 ,以明确H pylori定植情况 ,对照观察免疫保护效果。 结果 经PCR和酶切证实 ,构建了含 783bphpaA基因的重组原核表达质粒 pTrc99A -hpaA ,并将后者成功转化了减毒鼠伤寒沙门氏菌。重组菌能表达约 30kDaHpaA蛋白 ,重组HpaA量约占全菌体蛋白量的 38 9% ,Westernblot证实其有免疫反应性。重组菌对小鼠免疫保护率为 4 3 4 8% (10 / 2 3) ,与空白对照组比统计差异显著 (P =0 0 1)。结论 构建了表达H pyloriHpaA的重组减毒鼠伤寒沙门氏菌 ,该菌株对C5 7BL/ 6小鼠有免疫保护作用。
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| 关 键 词： | 幽门螺杆菌 hpaA基因 鼠伤寒沙门氏菌 疫苗 小鼠 |
| 文章编号： | 1002-2694(2002)02-0032-05 |
| 修稿时间： | 2001年2月10日 |
Immunoprotection of mice against Helicobacter pylori infection by oral immunization with attenuated Salmonella typhimurium expressing hpaA gene of Helicobacter pylori |
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| ZHU senlin,CHEN Minhu,CHEN Jie,et al.Immunoprotection of mice against Helicobacter pylori infection by oral immunization with attenuated Salmonella typhimurium expressing hpaA gene of Helicobacter pylori[J].Chinese Journal of Zoonoses,2002,18(2):32-36. |
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| Authors: | ZHU senlin CHEN Minhu CHEN Jie |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Helicobacter pylori hpaA gene Salmonella typhimurium Vaccine Mouse |
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