摘 要: | 目的明确PPP2R2C蛋白在不同发育阶段的小鼠睾丸中的表达与定位,探讨染料木黄酮(GEN)对新生小鼠睾丸组织PPP2R2C、细胞周期蛋白依赖性激酶2(CDK2)和波形蛋白(Vimentin)表达的影响。方法选用出生后1、6、10、15、20、30、60 d的雄性小鼠,采用免疫荧光技术观察PPP2R2C蛋白在各发育阶段小鼠睾丸中的细胞定位和表达;用2~3日龄雄性小鼠,取睾丸组织随机分为5组,即DMSO溶剂对照组和4个GEN剂量组(终浓度6.25、12.5、25、50μmol/L)。旋转通气法体外培养72 h,HE染色观察睾丸组织病理改变,Real-time PCR测定蛋白PPP2R2C、CDK2和Vimentin m RNA表达。结果免疫荧光结果发现PPP2R2C蛋白在小鼠睾丸间质细胞和其他细胞胞浆内表达;HE染色显示,各GEN剂量组均出现睾丸组织病理改变;Real-time PCR检测显示,6.25μmol/L GEN组PPP2R2C m RNA表达高于对照组(P=0.021),各剂量组CDK2 m RNA表达呈下降趋势(P0.05),GEN各剂量组Vimentin m RNA表达略有降低,但是差异无统计学意义(P0.05)。结论本研究首次发现PPP2R2C蛋白在小鼠睾丸组织中表达,其可能参与了小鼠睾丸发育、细胞分裂和精子发生过程。GEN可能通过调节体外培养小鼠睾丸PPP2R2C、CDK2和Vimentin基因的表达,影响睾丸发育和精子发生过程。
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