PHⅡ-7 作用于慢性粒细胞白血病细胞k562 的机制研究(摘要)

目的： PHⅡ-7是以靛玉红为模板合成的一种抗肿瘤药物，并有显著逆转耐药作用。实验室前期研究发现在人慢性粒细胞白血病k562细胞中，PHⅡ-7可与烯醇化酶ENO1相结合。本研究旨在探究PHⅡ-7通过ENO1对k562细胞体外抑癌作用机制。方法构建ENO1表达稳定干扰细胞株k562-shENO1和对照细胞株k562-shCON。通过MTT法检测PHⅡ-7对k562-shCON和k562-shENO1细胞株的生长抑制作用；通过细胞计数法检测k562-shCON和k562-shENO1细胞株生长差异；采用流式细胞仪测定细胞凋亡水平。采用逆转录PCR，实时荧光定量PCR和免疫印迹技术检测相关基因表达水平。结果通过real-time-PCR和免疫印迹实验验证k562-shCON和k562-shENO1干扰细胞株成功建立。k562-shENO1和k562-shCON细胞株体外生长无显著差异，PHⅡ-7对k562-shENO1和k562-shCON细胞株IC50无显著性差异。PHⅡ-7可诱导k562-shENO1和k562-shCON细胞株凋亡，并可激活caspase3、caspase9和PARP等凋亡相关蛋白。与k562-shCON相比较，k562-shENO1细胞对高浓度PHⅡ-7诱导凋亡作用更敏感。结论烯醇化酶ENO1与PHⅡ-7在人慢性粒白血病k562细胞中作用密切相关，干扰ENO1表达能在一定程度上增强PHⅡ-7的抑癌作用。