| 稳定整合靶向性Survivin基因RNA干涉载体胶质瘤细胞系的建立 |
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| 引用本文： | 张家墅,甄海宁,章翔,张瑞,左毅,王鹏,霍军丽.稳定整合靶向性Survivin基因RNA干涉载体胶质瘤细胞系的建立[J].中华神经外科疾病研究杂志,2009,8(3):218-222. |
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| 作者姓名： | 张家墅 甄海宁 章翔 张瑞 左毅 王鹏 霍军丽 |
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| 作者单位： | 1. 第四军医大学,西京医院全军神经外科研究所,陕西,西安,710033
2. 第四军医大学,基础部免疫学教研室,陕西,西安,710033 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金，陕西省自然科学基金 |
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| 摘 要： | 目的构建针对细胞凋亡抑制蛋白survivin（SVV）基因的特异性RNA干涉载体，并建立稳定转染该干涉载体的人胶质瘤细胞系。方法设计合成针对SVV基因和针对荧火虫荧光素酶（FLF）基因特异性RNA干涉片断，并分别克隆入pSilencer3．1-H1neo载体中，成功构建SVV基因RNA干涉载体pSilencer3．1-SVV和无关序列载体pSilencer3．1-FLF。RNA干涉载体、无关序列载体和空白载体经脂质体法转染胶质瘤细胞系U251，经G418筛选，采用实时定量反转录聚合酶链反应（real—timeRT—PCR）、免疫蛋白印迹（Western blot）和免疫细胞化学方法分别检测SVV基因在转染细胞中的表达情况。结果酶切鉴定和核苷酸序列分析证实，成功构建了SVV基因RNA干涉载体pSilencer3．1-SVV。获得了稳定转染干涉载体、无关序列载体和空白载体的细胞系分别命名为U251-S、U251-F和U251-P。U251-S细胞中SVV的mRNA和蛋白表达受到明显抑制，U251-F和U251-P细胞中SVV基因表达水平无明显变化。结论SVV基因特异性RNA干涉载体能够明显抑制SVV基因在U251细胞中的表达，这为进一步研究SVV在胶质瘤细胞系U251中的生物学功能和作用机制奠定了实验基础。
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| 关 键 词： | RNA干涉 Survivin 胶质瘤 |
Establishment of a glioma cell line stably transfected with survivin specific targeting RNA interference vector |
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| ZHANG Jiashu,ZHEN Haining,ZHANG Xiang,ZHANG Rui,ZUO Yi,WANG Peng,HUO Junli.Establishment of a glioma cell line stably transfected with survivin specific targeting RNA interference vector[J].Chinese Journal of Neurosurgical Disease Research,2009,8(3):218-222. |
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| Authors: | ZHANG Jiashu ZHEN Haining ZHANG Xiang ZHANG Rui ZUO Yi WANG Peng HUO Junli |
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| Institution: | 1 Institute of Neurosurgery of PLA, Xijing Hospital ; 2Department of Immunology, School of Basic Medicine, Fourth Military Medical University, Xi＇an 710033, China) |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Survivin |
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