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体外培养人胎儿软骨细胞的生物学特性
引用本文:张英,周广东,崔磊,刘伟,曹谊林.体外培养人胎儿软骨细胞的生物学特性[J].上海交通大学学报(医学版),2004,24(4):258-262.
作者姓名:张英  周广东  崔磊  刘伟  曹谊林
作者单位:上海第二医科大学第九人民医院整复外科上海市组织工程研究与开发中心,上海第二医科大学第九人民医院整复外科上海市组织工程研究与开发中心,上海第二医科大学第九人民医院整复外科上海市组织工程研究与开发中心,上海第二医科大学第九人民医院整复外科上海市组织工程研究与开发中心,上海第二医科大学第九人民医院整复外科上海市组织工程研究与开发中心 上海 200235,上海 200235,上海 200235,上海 200235,上海 200235
基金项目:国家重点基础研究发展规划资助项目(“973”项目)(G1999054309),国家高技术研究发展计划资助项目(“863”计划)(2002AA205011973).
摘    要:目的 建立人胎儿软骨细胞分离培养、扩增技术体系,研究其体外单层培养条件下的生长特性,探讨胎儿软骨细胞作为软骨组织工程种子细胞的可行性。方法酶消化法获取胎儿软骨细胞,体外培养扩增,经测定细胞生长曲线、群体倍增时间及累计倍增数目,观察细胞生长动力学并确定体外生长规律。通过免疫组织化学检测Ⅱ型胶原分泌,阿利辛蓝比色法测定基质糖胺多糖(GAG)含量。P1细胞接种于聚羟乙酸(PGA)纤维支架,观察两者生物相容性及细胞体外成软骨能力。结果 关节软骨细胞形态呈典型的多角形,随着传代的次数增加,逐渐变成“成纤维细胞样”的条梭形。平均倍增时间为74 h。细胞连续培养5代,累计倍增数目为7.83±0.42。P1-P5间接免疫组化Ⅱ型胶原表达阳性,P6不表达。GAG含量P1细胞低于P0细胞,随体外培养时间延长逐渐增加。P1细胞接种于PGA纤维支架,体外培养14 d,组织学观察显示有软骨组织形成。结论 胎儿软骨细胞经常规体外培养,至第6代失去分泌软骨特异性基质的功能。P1细胞接种PGA纤维展现良好的生物相容性,初步证实胎儿软骨细胞作为软骨组织工程种子细胞的可行性。

关 键 词:体外培养  胎儿软骨细胞  生物学特性  组织工程  种子细胞  酶消化法
文章编号:0258-5898(2004)04-0258-05
修稿时间:2003年7月8日

Biological characterization of in vitro cultured human fetal chondrocytes
ZHANG Ying,ZHOU Gang-dong,CUI Lei,LIU Wei,CAO Yi-lin.Biological characterization of in vitro cultured human fetal chondrocytes[J].Journal of Shanghai Jiaotong University:Medical Science,2004,24(4):258-262.
Authors:ZHANG Ying  ZHOU Gang-dong  CUI Lei  LIU Wei  CAO Yi-lin
Abstract:
Keywords:human fetal chondrocytes  physical characteristics  tissue engineering
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