| 人细胞周期蛋白cyclin D1基因RNAi表达载体的构建与鉴定 |
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| 引用本文： | 于冬梅,郝立君,郭小英,李颖,罗赛. 人细胞周期蛋白cyclin D1基因RNAi表达载体的构建与鉴定[J]. 中国肿瘤, 2007, 16(12): 1008-1011 |
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| 作者姓名： | 于冬梅 郝立君 郭小英 李颖 罗赛 |
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| 作者单位： | 哈尔滨医科大学附属第二医院,黑龙江,哈尔滨,150086 |
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| 摘 要： | [目的]构建针对人细胞周期蛋白cyclinD1基因的RNAi真核表达载体,检测其对人卵巢癌HO-8910细胞cyclinD1基因表达的干扰效率。[方法]以cyclinD1为靶向设计,合成的4条互补寡核苷酸链克隆至pSUPER载体中,得到重组质粒pSUPER-C1￣4,行双酶切分析后测序鉴定;运用脂质体介导转染HO-8910细胞,G418筛选;采用RT-PCR检测对cyclinD1基因mRNA表达的干扰,并筛选有效的siRNA干扰序列。[结果]经酶切测序鉴定证实,重组质粒中已插入目的序列;RT-PCR表明有4个重组载体均不同程度抑制目的基因的转录,但以pSUPER-C2的干扰效率最强。[结论]在卵巢癌细胞系筛选出有效干扰cyclinD1基因表达siRNA序列,成功构建针对cyclinD1基因的RNAi真核表达载体有效抑制目的基因的表达。
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| 关 键 词： | 载体构建 |
| 文章编号： | 1004-0242（2007）12-1008-04 |
| 收稿时间： | 2007-01-18 |
| 修稿时间： | 2007-03-14 |
Construction and Identification of Vector Expressing RNA Interference Aimed at Human Cyclin D1 Gene |
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| YU Dong-mei, HAO Li-jun, GUO Xiao-ying, et-al.. Construction and Identification of Vector Expressing RNA Interference Aimed at Human Cyclin D1 Gene[J]. CHINA CANCER, 2007, 16(12): 1008-1011 |
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| Authors: | YU Dong-mei HAO Li-jun GUO Xiao-ying et-al. |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | RNAi siRNA cyclin D1 |
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