| 重组人绒毛膜促性腺激素-β亚基的纯化及生物活性测定 |
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| 引用本文： | 徐冉行,刘东海,冯伟云,张顺,毛联钢.重组人绒毛膜促性腺激素-β亚基的纯化及生物活性测定[J].实验与检验医学,2005,23(6). |
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| 作者姓名： | 徐冉行 刘东海 冯伟云 张顺 毛联钢 |
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| 摘 要： | 目的构建人绒毛膜促性腺激素(HCGβ)原核表达载体PG5-HCGβ,使HCGβ在大肠杆菌中获得高效表达.建立一条简单、快速、高效的纯化复性路线,获得具有生物活性的高纯度rHCG β.方法以本室克隆的PCRII/HCGβ为模板,构建PG5-HCG β,转化大肠杆菌BL21表达HCG β.表达蛋白顺次用凝胶过滤和离子交换层析两步分离纯化.结果酶切及序列结果显示,PG5-HCGβ构建正确,HCG β表达约占菌体总蛋白的20%.经过凝胶过滤和离子交换层析两步分离纯化,获得rHCG β纯度达95%以上.复性的rHCG β具有促进小鼠子宫生长的生物学活性.结论构建的PG5-HCG β表达载体在大肠杆菌中获得高效表达,纯化复性的rHCGβ蛋白具有较高的生物学活性,为今后的rHCGβ生产打下了良好的基础.
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| 关 键 词： | 绒毛膜促性腺激素-β亚基 原核表达 纯化 |
Studies on purification and activity of recombinant human chorionic gonadotropin beta subunit |
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