| 人p27^kip1基因的克隆及其真核表达载体的构建 |
| |
| 引用本文： | 吴芃,郑少斌,谭万龙,左翼.人p27^kip1基因的克隆及其真核表达载体的构建[J].广东寄生虫学会年报,2008(4):285-287. |
| |
| 作者姓名： | 吴芃 郑少斌 谭万龙 左翼 |
| |
| 作者单位： | 南方医科大学南方医院泌尿外科,广州510515 |
| |
| 摘 要： | 目的克隆人p27^kip1基因并构建其真核表达载体，为进一步研究其功能奠定基础。方法根据p27^kip1已知序列设计引物，分别在上下游引入Mlu I和Spe I酶切位点，从人肾脏组织中提取总RNA，经逆转录PCR得到cDNA，亚克隆入携带GFP报告基因的pWPXL真核载体中，经筛选获得正确的克隆，并通过双酶切凝胶电泳及测序鉴定。将成功构建的质粒在脂质体介导下转染肾癌786．0细胞，并通过RT—PCR及Western-blot检测表达情况。结果克隆了人p27^kip1基因，与GenBank中序列比对无误；真核表达载体经酶切鉴定表明为正确重组子，成功构建了真核表达载体。转染肾癌786-0细胞48h后，p27^kip1蛋白出现高表达。结论成功克隆了p27即基因，构建了其真核表达载体并在肾癌细胞中成功表达，为p27^kip1在肾肿瘤中的进一步研究提供了工作基础。
|
| 关 键 词： | p27^kip1 基因表达 分子克隆 人 |
Cloning of Human p27^kip1 Gene and Construction of Its Eukaryotic Expression Vector |
| |
| WU Peng,ZHENG Shao-bin,TAN Wan-long,ZUO Yi.Cloning of Human p27^kip1 Gene and Construction of Its Eukaryotic Expression Vector[J].Journal of Tropical Medicine,2008(4):285-287. |
| |
| Authors: | WU Peng ZHENG Shao-bin TAN Wan-long ZUO Yi |
| |
| Institution: | (Department of Urology, Nanfang Hospital, Southern Medical University, Guangzhou 510515, China) |
| |
| Abstract: | |
| |
| Keywords: | p27^kip1 gene expression molecular cloning human |
| 本文献已被 维普 等数据库收录！ |
