| 西尼罗I型病毒亚克隆的构建及其鉴定 |
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| 引用本文： | 商涛,;马文丽,;黄吉城,;张海燕,;廖之君,;陈霞,;郑文岭.西尼罗I型病毒亚克隆的构建及其鉴定[J].广东寄生虫学会年报,2008(3):205-208. |
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| 作者姓名： | 商涛 ;马文丽 ;黄吉城 ;张海燕 ;廖之君 ;陈霞 ;郑文岭 |
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| 作者单位： | [1]南方医科大学基因工程研究所,广州510515; [2]广东出入境检验检疫局检验检疫技术中心,广州510623; [3]广州军区疾病预防控制中心,广州510507; [4]华南基因组研究中心,广州510800 |
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| 基金项目： | 国家质量监督检验检疫总局科技计划资助项目（No.2006IK168）. |
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| 摘 要： | 目的构建西尼罗病毒基因组的cDNA亚克隆，为西尼罗病毒全长cDNA克隆的研发和应用打下基础。方法根据基因组中限制性酶切位点的分布设计4对引物，QIAamp RNA抽提试剂盒提取西尼罗病毒培养细胞BHK-21的总RNA，长片段RT-PCR技术扩增目的基因片段。将目的基因片段与pMD18-T载体进行连接，转化人感受态细胞E.coli DH5α，进行蓝白斑筛选后得到阳性克隆。将重组质粒进行PCR和测序鉴定。结果获得的目的基因片段经PCR和测序结果表明西尼罗病毒功能基因正确地克隆进入载体。结论成功获得西尼罗I型病毒功能基因的cDNA亚克隆，可应用于西尼罗病毒全长cDNA克隆的制备。
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| 关 键 词： | 克隆载体 亚克隆构建 长片段RT-PCR 西尼罗病毒 |
Construction and Identification of cDNA Subciones of West Nile Virus Lineage I |
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| Institution: | SHANG Tao, MA Wen-li, HUANG Ji-cheng, ZHANG Hai-yan, LIAO Zhi-jun, CHEN Xia, ZHENG Wen-ling (Institute of Genetic Engineering, Southern Medical University, Guangzhou 510515; Inspection and Quarantine Technical Center, Guangdong Entry-exit Inspection and Quarantine Bureau, Guangzhou 510623 ; Disease Control and Prevention Center of Guangzhou Command , Guangzhou 510507; South China Genomics Research Center, Guangzhou 510800, China) |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | cloning vector sub clone construction LRP West Nile virus |
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