| IIn-UK融合基因在CHO细胞中的高表达研究 |
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| 引用本文： | 刘志刚,林建波,张国强,安怀杰,徐桂清,俞炜源.IIn-UK融合基因在CHO细胞中的高表达研究[J].军事医学科学院院刊,2004,28(3):209-211,224. |
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| 作者姓名： | 刘志刚 林建波 张国强 安怀杰 徐桂清 俞炜源 |
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| 作者单位： | 军事医学科学院生物工程研究所,北京,100071 |
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| 基金项目： | 国家高技术研究发展计划 (“863”计划 )资助项目( 2 0 0 1AA2 15 3 5 1) |
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| 摘 要： | 目的 :构建新型高效真核表达载体 ,实现人源化鼠抗人纤维蛋白单链抗体 低分子量尿激酶 (IIn UK)在CHO细胞中的高表达。方法 :利用常规分子生物学方法 ,通过对neo基因的表达进行不同程度的弱化 ,构建了一系列新型真核表达载体 ,以IIn UK融合基因为目的基因 ,比较这些真核表达载体实现外源基因高表达的能力 ,然后挑选高表达的克隆 ,通过MTX加压扩增 ,以提高IIn UK融合基因的拷贝数及表达水平。结果与讨论 :构建了 5种新型真核表达载体 ,并筛选出优化的真核表达载体 ,通过MTX加压扩增 ,实现了IIn UK融合基因在CHO细胞中的高表达 ,表达量达到 10 μg/ (10 6细胞·2 4h )。
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| 关 键 词： | 真核表达载体 neo基因 CHO／dhfr^-细胞 重组蛋白 高表达 |
| 文章编号： | 1000-5501(2004)03-0209-04 |
High expression of IIn-UK fusion gene in CHO cell using new mammalian expression vector |
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| LIU Zhi-Gang,LIN Jian-Bo,ZHANG Guo-Qiang,AN Huai-Jie,XU Gui-Qing,YU Wei-Yuan.High expression of IIn-UK fusion gene in CHO cell using new mammalian expression vector[J].Bulletin of the Academy of Military Medical Sciences,2004,28(3):209-211,224. |
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| Authors: | LIU Zhi-Gang LIN Jian-Bo ZHANG Guo-Qiang AN Huai-Jie XU Gui-Qing YU Wei-Yuan |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | eukaryotic expression vector neo gene CHO/dhfr -cell recombinant protein overexpression |
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