抑制整合素连接激酶（ILK）表达对大鼠肾小球系膜细胞细胞间隙连接蛋白43表达的影响

目的研究抑制整合素连接激酶（ILK）表达对大鼠肾小球系膜细胞（RMC）细胞间隙连接蛋白43（Cx43）表达的影响。方法将大鼠肾小球系膜细胞分为RMC组（n-6）、ILK-consiRNA转染组（n=6）和ILK-siRNA转染组（n=6）。合成抑制ILK基因的siRNA，待细胞长至60％融合后，ILK-siRNA转染组和ILK-con siRNA转染组分别用脂质体转染ILK-siRNA或ILK-con siRNA，RMC组仅加入脂质体，24h后收集细胞，提取总蛋白和总RNA，用RT-PCR和Western blotting观察ILK和Cx43 mRNA和蛋白的表达。转染后继续培养24、48、72h，MTT法检测细胞活力。结果与RMC组和ILK-con siRNA转染组比较，ILK-siRNA组ILK mRNA和蛋白的表达均下降30％-50％（P〈0.05，P〈0.01），Cx43 mRNA水平增加30％-40％（P〈0.05），Cx43蛋白水平增加60％-70％（P〈0.01）。应用ILK-siRNA转染系膜细胞后24、48、72h，细胞活力均显著高于RMC组和ILK-con siRNA转染组（P〈0.05，P〈0.01）。结论抑制ILK途径可上调肾小球系膜细胞Cx43的表达，增强细胞活力；Cx43的调节可能是部分通过ILK途径实现的。