| KAI1基因转染的胰腺癌细胞系的建立 |
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| 引用本文： | 徐建华,郭晓钟,刘民培,任丽楠,李宏宇,吴春燕. KAI1基因转染的胰腺癌细胞系的建立[J]. 中华胰腺病杂志, 2004, 4(3) |
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| 作者姓名： | 徐建华 郭晓钟 刘民培 任丽楠 李宏宇 吴春燕 |
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| 作者单位： | 110016,辽宁沈阳,沈阳军区总医院消化科 |
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| 摘 要： | 目的转染pCMV-KAI1重组质粒入人胰腺癌细胞株MiaPacaⅡ和Panc 1,观察KAI1基因的表达,为进行KAI1基因在胰腺癌中抗转移作用的有关研究提供实验用靶细胞,并为今后利用KAI1基因治疗胰腺癌提供实验和理论依据.方法采用Western blot方法从7种胰腺癌细胞中筛选出无KAI1表达的MiaPacaⅡ和Panc 1细胞株,通过脂质体转染法将pCMV-KAI1重组质粒转染到MiaPacaⅡ和Panc 1中,经G418筛选4周,获得单克隆细胞系,应用Western blot、免疫荧光及免疫细胞化学方法检测转染细胞系KAI1蛋白的表达.结果获得了稳定表达KAI1基因的MiaPacaⅡ和Panc 1胰腺癌细胞克隆;经Western blot分析显示转染后的胰腺癌细胞株MiaPacaⅡ与Panc 1有明确的分子质量为29100 KAI1蛋白表达,而未转染细胞无KAI1蛋白表达;免疫荧光显示,转染的胰腺癌细胞质中可见明显的荧光,而无转染的母细胞无荧光;免疫细胞化学检测显示,无转染的细胞呈阴性反应,转染的细胞呈中到强度的阳性反应.结论 pCMV-KAI1重组质粒经转染入人胰腺癌细胞株MiaPacaⅡ和Panc 1后可表达KAI1蛋白,从而建立了KAI1蛋白表达的MiaPacaⅡ和Panc 1细胞系.
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| 关 键 词： | 胰腺肿瘤 KAI1 转染 培养的肿瘤细胞 |
Construction of pancreatic cancer cell line transfected by KAI1 gene |
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