| 增强型绿色荧光蛋白原核表达载体的构建及表达 |
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| 引用本文： | 段斯亮,于声,苏晓庆.增强型绿色荧光蛋白原核表达载体的构建及表达[J].广西医学,2008,30(10). |
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| 作者姓名： | 段斯亮 于声 苏晓庆 |
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| 作者单位： | 柳州医学高等专科学校,柳州市,545006;贵阳医学院,贵阳市,550004 |
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| 基金项目： | 柳州医学高等专科学校硕士研究生科研启动项目经费资助课题 |
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| 摘 要： | 目的 构建以增强型绿色荧光蛋白(EGFP)为标记的原核表达栽体,并观察EGFP基因在大肠杆菌中的表达情况.方法 据已知的EGFP基因序列,设计引物,并引入Nde Ⅰ和Xho Ⅰ酶切位点.采用PCR技术从含有EGFP的质粒pEGFP-C1中克隆EGFP编码序列;将其亚克隆入表达载体pTWIN1,得到以EGFP为标记的原核表达载体pTWIN-EGFP.转化大肠杆菌ER2566菌株,IPTG诱导EGFP基因表达.结果 经过IPTG诱导后,细菌培养物在长波紫外线的照射下,发出明亮的绿色荧光.结论 成功构建了原核表达载体pTWIN-EGFP,为应用EGFP作为报告基因和筛选标记奠定了实验基础.
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| 关 键 词： | 增强型绿色荧光蛋白 报告基因 表达载体 原核表达 |
Construction and expression of eukaryotic expression vector pTWIN-EGFP |
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| DUAN Si-liang,YU Sheng,SU Xiao-qing.Construction and expression of eukaryotic expression vector pTWIN-EGFP[J].Guangxi Medical Journal,2008,30(10). |
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| Authors: | DUAN Si-liang YU Sheng SU Xiao-qing |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Enhanced green fluorescent protein Reporter gene Expression vector Eukaryotic expression |
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