| c-kit突变型人胃肠间质瘤永生化细胞系的建立与鉴定 |
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| 引用本文： | 刘星,蒋伟忠,官国先,陈致奋,卢辉山,周永建. c-kit突变型人胃肠间质瘤永生化细胞系的建立与鉴定[J]. 临床和实验医学杂志, 2015, 0(4) |
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| 作者姓名： | 刘星 蒋伟忠 官国先 陈致奋 卢辉山 周永建 |
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| 作者单位： | 福建医科大学附属协和医院结直肠外科 福建 福州 350001 |
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| 基金项目： | 福建省卫生厅青年科研课题，国家临床重点专科建设项目经费资助，福建省临床重点专科建设项目资助 |
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| 摘 要： | 目的通过在c-kit突变型人胃肠间质瘤原代细胞中过表达人端粒酶逆转录酶(h TERT),建立c-kit突变型人胃肠间质瘤永生化细胞系。方法利用聚合酶链反应(PCR)技术获得h TERT目的基因片段,测序正确后,体外构建端粒酶亚单位(h TERT)逆转录病毒表达载体,转染c-kit突变型胃肠间质瘤原代细胞,通过RT-PCR及western bloth技术检测h TERT在原代细胞内的表达变化,选取h TERT表达升高的细胞,利用有限稀释法获得高表达h TERT的单克隆细胞株。结果实验中成功获得h TERT目的基因片段,获得的细胞株与原代细胞相比h TERT表达上调,且体外传代50次后依然保持很好的细胞形态及活力。结论成功获得c-kit突变型人胃肠间质瘤永生化细胞系,为进一步研究c-kit突变对胃肠间质瘤的影响奠定基础。
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| 关 键 词： | c-kit突变型 胃肠间质瘤细胞 hTERT 永生化 |
Established immortalized c-kit mutanted human gastrointestinal stromal tumors cell line express the hTERT |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | c-kit Mutanted GⅠST hTERT Ⅰmmortalized |
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