ALCAM沉默对新生大鼠坏死性小肠结肠炎的保护作用研究

目的研究活化白细胞黏附分子（ALCAM）沉默对坏死性小肠结肠炎（NEC）的影响及作用机制。方法24只雄性SD新生大鼠按随机数字表法分为对照组、NEC组、沉默阴性对照组、ALCAM沉默组，每组6只。NEC组、沉默阴性对照组和ALCAM沉默组分别尾静脉注射0.9%氯化钠注射液、阴性对照腺相关病毒载体和ALCAM腺相关病毒载体；除对照组外，各组大鼠采用人工饲养与缺氧复氧和冷刺激诱导以建立NEC模型。采用ELISA法测定各组大鼠血清IL-1β、IL-6水平，采用HE染色法、Tunel染色法评价肠组织病理改变和细胞凋亡情况，采用免疫组化染色法测定CD166表达率，采用qRT-PCR法检测肠组织ALCAM的mRNA相对表达量，采用Westernblot法检测肠组织ALCAM、E-钙黏蛋白（E-cadherin）、β-连环蛋白（β-catenin）相对表达量。结果与对照组比较，NEC组大鼠血清IL-1β、IL-6水平升高，肠组织病理改变明显，细胞凋亡率增加，CD166表达率升高，肠组织ALCAM的mRNA及蛋白、β-catenin蛋白相对表达量升高，E-cadherin蛋白相对表达量降低，差异均有统计学意义（均P＜0.01）。与沉默阴性对照组比较，ALCAM沉默组新生大鼠血清IL-1β、IL-6水平降低，肠组织病理改变减轻，细胞凋亡减少，CD166表达率降低，肠组织ALCAM的mRNA及E-cadherin蛋白相对表达量升高，ALCAM蛋白、β-catenin蛋白相对表达量降低，差异均有统计学意义（均P＜0.05）。结论沉默ALCAM表达对NEC新生大鼠的肠道损伤具有保护作用，其作用与炎性细胞因子水平下降、E-cadherin/β-catenin通路蛋白表达改变有关。