升陷汤调节Wnt3a/β-catenin信号途径介导的细胞衰老改善特发性肺纤维化大鼠肺功能

目的 观察升陷汤对特发性肺纤维化（IPF）大鼠Wnt3a/β-连环蛋白（β-catenin）途径介导的细胞衰老的作用特点，揭示该方改善IPF大鼠肺功能的可能机制。方法 32只SPF级SD大鼠随机分为假手术组、模型组、吡非尼酮组和升陷汤组。气管内滴注博来霉素（0.005 g·kg^-1）复制IPF大鼠模型。术后次日灌胃，升陷汤组灌胃升陷汤配方颗粒水溶液（0.78 g·kg^-1），吡非尼酮组灌胃吡非尼酮混悬液（0.05 g·kg^-1），其余各组灌胃去离子水（10 mL·kg^-1），连续28 d。测定大鼠肺功能后取肺组织：苏木素-伊红（HE）和马松（Masson）染色观察大鼠肺组织病理形态学变化，并行Szapiel和Ashcroft评分；实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time PCR）检测端粒长度；蛋白免疫印迹法（Western blot）检测上皮-间质转化（EMT）标记物［α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）、E-钙黏蛋白（E-cadherin）］、端粒酶逆转录酶（TERT）、衰老相关蛋白（p53、p21）、衰老相关分泌表型［白细胞介素-6（IL-6）、基质金属蛋白酶-1（MMP-1）］和Wnt信号途径关键蛋白［Wnt3a、糖原合酶激酶-3β（GSK-3β）、β-catenin、细胞周期蛋白D₁（Cyclin D₁）、c-Myc］表达。结果 与假手术组比较，模型组大鼠最大呼吸流量（PEF）和每分钟通气量（MV）显著降低（P<0.01），呼吸频率（f）显著升高（P<0.01），Szapiel和Ashcroft评分及α-SMA、p53、p21、IL-6、MMP-1、Wnt3a、GSK-3β、β-catenin、Cyclin D₁、c-Myc蛋白表达显著升高（P<0.01），E-cadherin和TERT表达及端粒长度显著降低（P<0.01）。与模型组比较，升陷汤组大鼠PEF和MV显著升高（P<0.01），f显著降低（P<0.01），Szapiel和Ashcroft评分及α-SMA、p53、p21、IL-6、MMP-1、Wnt3a、GSK-3β、β-catenin、Cyclin D₁、c-Myc蛋白表达明显降低（P<0.05，P<0.01），E-cadherin和TERT表达及端粒长度显著升高（P<0.01）。结论 升陷汤对IPF大鼠肺功能具有显著地保护作用，其机制可能是作用于Wnt3a/β-catenin信号途径，调节TERT诱导的细胞衰老以抑制EMT实现。