基于HPLC-Q-TOF-MS/MS加味清络颗粒生物碱类化学成分分析及多指标含量测定

目的 对加味清络颗粒中生物碱类成分进行定性鉴别分析，建立加味清络颗粒生物碱类多成分含量测定方法。方法 采用HPLC-Q-TOF-MS/MS技术对加味清络颗粒进行正、负离子模式扫描，利用MassHunter软件计算化合物准确相对分子质量，结合质谱二级碎片信息及对照品比对，对加味清络颗粒中生物碱类成分进行定性鉴别，并总结化合物裂解规律；利用HPLC测定加味清络颗粒中6个生物碱成分的含量，检测条件：采用Phenomenex Gemini C₁₈色谱柱（250 mm×4.6 mm，5μm)；以乙腈为流动相A，磷酸盐缓冲溶液（pH 5.8）为流动相B，梯度洗脱，柱温30 ℃，体积流量0.9 mL/min，进样量10 μL，检测波长210 nm。结果 加味清络颗粒中共鉴定出50个生物碱成分，分别来源于青风藤、苦参、延胡索、知母，其中喹诺里西啶类生物碱16个、苄基四氢异喹啉类生物碱31个、其他类型生物碱3个；建立了HPLC同时测定加味清络颗粒中苦参碱、槐果碱、青藤碱、原阿片碱、延胡索乙素、延胡索甲素的多指标含量测定方法，该方法中6个待测成分在检测质量浓度范围内线性关系良好（r≥0.999 9），精密度、重复性、稳定性RSD均小于4%，样品中苦参碱、槐果碱、青藤碱、原阿片碱、延胡索乙素、延胡索甲素的平均加样回收率分别为94.32%、96.89%、97.83%、109.53%、99.32%、87.13%，RSD值分别为3.24%、4.99%、4.95%、4.85%、2.52%、5.95%。结论 建立的方法可准确、灵敏地对加味清络颗粒中的生物碱类化学成分进行定性及定量分析，为加味清络颗粒后续物质基础研究、质量控制、制剂开发建立了基础。

Chemical composition analysis and multi-index content determination of alkaloids in Jiawei Qingluo Granules by HPLC-Q-TOF-MS/MS