TGF-β1在乳腺癌EMT中作用机制探讨

目的 乳腺癌的发病率不断上升,上皮-间质转化(epithelial to mesenchymal transition,EMT)在乳腺癌病变中广泛存在.本研究探讨TGF-β1在乳腺癌EMT中的作用及PTPN12在此过程中的作用和相关机制.方法 蛋白质印迹法检测TGF-β1处理乳腺癌细胞后EMT相关基因以及PI3K、p-AKT和mTOR的表达;免疫组织化学检测乳腺癌组织和癌旁组织中PTPN 12表达;免疫共沉淀检测PTPN12和p-AKT是否有直接相互作用;蛋白质印迹法检测转染LV5-PTPN12后,E-Cadherin、Vimentin、Fibronectin、PI3K、p-AKT和mTOR蛋白的表达情况;裸鼠皮下成瘤检测PT-PN12对乳腺癌成瘤大小以及体积的影响.结果 NC组和TGF-β1组Vimentin蛋白表达量分别为(17.2±2.3)％和(79.7±8.3)％,t=12.5,P=0.008;Fibronectin蛋白表达量分别(17.4±2.3)％和(77.4±7.5)％,t=12.1,P=0.016.PTPN12在乳腺癌组织中表达明显降低,PTPN12与乳腺癌病理分期分级以及腋窝淋巴结受累数目有关,NC组和TGF-β1组PI3K蛋白表达量分别为(18.6±1.9)％和(76.3±5.9)％,t=12.1,P=0.029;p-AKT蛋白表达量分别为(27.6±3.2)％和(54.1±6.2)％,t=11.7,P=0.013;mTOR蛋白表达量分别为(35.2±3.2)％和(72.2±5.3)％,t=18.3,P=0.031;PTPN12和p-AKT有直接相互作用;PTPN12可以抑制TGF-β1诱导的EMT,LV5-PTPN12组和LV5-NC组Vimentin蛋白表达量分别为(17.2±2.3)％和(79.7±8.3)％,t=11.9,P＜0.018;Fibronectin蛋白表达量分别为(17.4±2.3)％和(77.4±7.5)％,t=10.2,P=0.019;E-Cadherin蛋白表达量分别为(82.1±8.4)％和(0.22±0.02)％,t=13.7,P＜0.001.PTPN12可以通过PI3K/AKT信号通路起作用,LV5-PTPN12组和LV5-NC组PI3K蛋白表达量分别为(13.2±1.2)％和(56.2±5.1)％,t=7.1,P=0.021;p-AKT蛋白表达量分别为(23.5±2.5)％和(77.1±6.3)％,t=9.2,P=0.008;mTOR蛋白表达量分别为(28.2±3.1)％和(71.7±6.1)％,t=12.8,P=0.032.体内实验表明,与对照组相比,LV5-PTPN12组荷瘤小鼠肿瘤体积和体质量都明显变小,LV5-PTPN12组和LV5-NC组肿瘤体积分别为(2.8±0.2)和(0.4±0.02) cm3,t'=13.8,P＜0.001;体质量分别为(3.1±0.3)和(0.4±0.02)g,t'=18.6,P＜0.001.结论 PTPN12在TGF-β1作用下通过PI3K/AKT信号通路诱导乳腺癌的EMT中起抑制作用.