高糖诱导HT-22小鼠海马神经元代谢记忆细胞模型的构建及影响 |
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作者姓名: | 段云峰 许永劼 杨婷婷 黄昶煜东 朱丽英 李兴 潘卫 |
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作者单位: | 1. 贵州医科大学附属医院产前诊断中心;2. 贵州医科大学医学检验学院;3. 贵州医科大学附属医院临床检验中心;4. 贵州中医药大学基础医学院 |
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基金项目: | 国家自然科学基金地区科学基金项目(81960151,81960822,82260165,82300920); |
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摘 要: | 目的 体外构建高糖诱导HT-22小鼠海马神经元“代谢记忆”细胞模型,探究“代谢记忆”对HT-22细胞凋亡和组蛋白乙酰化的影响。方法 以高糖培养基(葡萄糖浓度为55 mmol/L)和常规糖培养基(葡萄糖浓度为25 mmol/L)培养HT-22细胞,分为常糖组(NG 4、6、8组,25 mmol/L葡萄糖分别培养4、6、8 d),高糖组(HG 4、6、8组,高糖培养4、6、8 d),代谢记忆组(HG2NG2、HG2NG4、HG2NG6、HG4NG2、HG4NG4组,即高糖2 d转25 mmol/L葡萄糖培养2、4或6 d,高糖4 d转25 mmol/L葡萄糖培养2 d或4 d)。CCK-8法检测细胞活力变化,检测细胞培养上清液中乳酸脱氢酶(LDH)释放量,筛选出建立“代谢记忆”模型的最佳作用时间。后续将细胞分为NG4组、NG8组、HG4组、HG4NG4组和HG8组,光学显微镜观察各组细胞形态;流式细胞术检测各组细胞凋亡率;酶联免疫吸附试验(ELISA)检测去乙酰化酶(HDAC)和组蛋白乙酰转移酶(HAT)活性;Western blot检测组蛋白去乙酰化酶4(HDAC4)、B淋巴细胞瘤-2(...
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关 键 词: | 糖尿病 脑疾病 细胞凋亡 组蛋白乙酰转移酶 组蛋白脱乙酰基酶类 HT-22 代谢记忆 |
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