改良地黄散抑制TGF-β1-CTGF信号通路改善肾间质纤维化的研究

目的 研究改良地黄散对部分输尿管梗阻（PUUO）大鼠肾间质纤维化作用以及探讨其可能的机制。方法 80只SD大鼠，随机均分为对照组、模型组、低剂量组、高剂量组，每组20只。高低剂量组、模型组采用腰大肌管包埋法建立PUUO模型，对照组仅切除左侧肾。高剂量组（2 mL/d）和低剂量组（1 mL/d）予以改良地黄散煎剂灌胃，对照组和模型组予均给予等量生理盐水灌胃。分别于建模后4周、8周每组取10只采集血、尿样本，测定各组大鼠血清肌酐(SCr)、尿素氮(BUN)、24 h尿蛋白定量。测量肾组织大小、肾皮质厚度。制备肾组织切片，通过HE染色、Masson染色，观察各组肾脏病理组织学改变，以及肾脏纤维化情况。采用免疫组织化学法检测各组大鼠转化生长因子β1（TGF-β1）、结缔组织生长因子（CTGF）、α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）在肾组织的表达情况；采用qPCR检测TGF-β1、CTGF mRNA表达。结果 4周时:模型组相大鼠炎性细胞浸润，局部灶状萎缩坏死，较多胶原纤维化形成。高低剂量组较模型组病理改变不明显，肾间质增宽仅有少许间质纤维化。8周后:模型组淋巴细胞浸润，肾小球坏死，结构彻底改变。间质纤维增生网状成片。高低剂量组较模型组炎性细胞浸润较轻，胶原染色较轻淡，高剂量组变化最小。TGF-β1、CTGF、α-SMA蛋白平均阳性表达率两个药物治疗组与模型组相比，4周时低剂量组均无差异，8周时两个药物治疗组均有显著差异（ P <0.01）。比较TGF-β1、CTGF mRNA表达时发现，低剂量组4周时与模型组相比均无差异，8周时高剂量组与模型组相比均有差异（ P <0.05）。结论 改良地黄散可能通过影响TGF-β1-CTGF信号通路，下调α-SMA的阳性表达，减轻肾纤维化的病理变化，延缓肾纤维化的发展。