郁金水煎剂对四氯化碳致急性肝损伤小鼠肝细胞p53和caspase-3表达的影响及其对肝损伤的保护作用

目的：探讨单味郁金水煎剂对四氯化碳（CCl4）致急性肝损伤小鼠肝细胞凋亡基因p53和caspase-3蛋白表达的影响，阐明郁金对肝损伤保护作用的机制。方法:ICR小鼠60只，随机分为空白对照组（等体积生理盐水）、模型组（等体积生理盐水）、郁金低剂量组（2.5 g/kg）、郁金中剂量组（5.0 g/kg）、郁金高剂量组（10.0 g/kg）和阳性药组 (甘利欣 22.5 mg/kg)；连续给药7 d后，除空白对照组外各组小鼠均通过CCl4复制小鼠急性肝损伤模型。计算肝指数，测定血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)活性，HE染色观察肝组织形态学变化；RT-PCR法检测肝细胞p53基因转录情况；免疫组织化学法检测肝细胞caspase-3蛋白表达。结果：与空白对照组比较，模型组小鼠肝指数明显增加（P<0.05）；与模型组比较，各给药组小鼠肝指数明显降低（P<0.05）。与空白对照组比较，模型组小鼠血清ALT增高（P<0.01）；与模型组比较，阳性药组及郁金高、中剂量组小鼠血清ALT明显降低（P<0.05）。肝脏形态学变化，肉眼观察，空白对照组小鼠肝脏呈现粉红色，质软而富有弹性，模型组小鼠肝脏明显肿大、呈微黄色，表面可见散在点状及片状黄褐色斑点，质脆，各给药组小鼠肝脏大小、颜色及质地均界于空白对照组与模型组之间，且表面无明显黄褐色斑点；镜下观察，空白对照组小鼠肝脏结构正常，模型组小鼠细胞呈明显局灶性气球样变、水样变性和死亡，而阳性药组和郁金中、高剂量组小鼠与模型组比较肝组织上述病灶数量减少。与空白对照组比较，模型组小鼠肝细胞p53基因转录明显增强（P<0.05）；与模型组比较，郁金高剂量组小鼠肝细胞p53基因转录显著减弱 （P<0.05）。与模型组比较，郁金给药组小鼠肝细胞caspase-3蛋白表达减弱。结论：郁金对CCl4致小鼠急性肝损伤有一定的拮抗作用，其机制之一可能与下调凋亡基因p53和caspase-3蛋白的表达、阻碍肝细胞凋亡有关。