| 抑制性消减杂交法筛选植入人发角蛋白与单纯脊髓损伤大鼠基因表达的差异 |
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| 引用本文： | 徐锡金,林新华,霍霞,朴仲贤,朴英杰.抑制性消减杂交法筛选植入人发角蛋白与单纯脊髓损伤大鼠基因表达的差异[J].中国临床康复,2006,10(8):85-88. |
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| 作者姓名： | 徐锡金 林新华 霍霞 朴仲贤 朴英杰 |
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| 作者单位： | [1]汕头大学医学院细胞生物学与遗传学教研室,广东省汕头市515041 [2]汕头大学医学院中心实验室,广东省汕头市515041 [3]南方医科大学组织胚胎学教研室,广东省广州市510515 |
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| 基金项目： | 广东省自然科学基金资助项目（022275,04020247）,广东省高校自然科学研究项目（0142） |
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| 摘 要： | 目的：采用抑制性消减杂交筛选植入人发角蛋白大鼠损伤脊髓基因性差异表达。
方法：实验于2004-11在汕头大学中心实验室进行。分别从植入人发角蛋白损伤组与单一损伤对照组4^thw组织中提取mRNA，反转录成双链cDNA，经RsaⅠ酶切、接头连接、两次消减杂交和两次抑制性聚合酶链扩增，而后将消减cDNA产物进行T／A克隆和测序分析。
结果：所获植入人发角蛋白脊髓损伤组织差异表达基因的消减cDNA产物散布在280～800bp范围。经蓝白筛选和酶切鉴定，共得到232个阳性克隆。对其中20个做测序分析获得了氨基酸转运蛋白系统A2（Ata2）、细胞色素氧化酶Ⅲ（coxⅢ）、抗过氧化物蛋白5（Prd5）、Tap1蛋白和半胱氨酸蛋白酶抑制剂（Cst3）等5个表达蛋白。
结论：prd5、Ata2和COXⅢ分别通过参与脊髓损伤后抗氧化损伤过程。起到抑制自由基、兴奋性氨基酸的产生，减轻Ca离子紊乱的程度。降低了继发性损害对脊髓组织的二次损伤程度；而Tap1蛋白和Cst3则参与人发角蛋白的降解过程。
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| 关 键 词： | 脊髓损伤 角蛋白 基因 抑制性消减杂交法 筛选植入 人发角蛋白 基因表达 大鼠 |
| 收稿时间： | 09 16 2005 12:00AM |
| 修稿时间： | 01 25 2006 12:00AM |
Difference of gene expression between rats with Simple spinal cord injury and those undergoing human hair keratin transplantation by using suppression subtractive hybridization |
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| Xu Xi-jin, Lin Xin-hua, Huo xia, Piao Zhong-xian, Piao Ying-jie.Difference of gene expression between rats with Simple spinal cord injury and those undergoing human hair keratin transplantation by using suppression subtractive hybridization[J].Chinese Journal of Clinical Rehabilitation,2006,10(8):85-88. |
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| Authors: | Xu Xi-jin Lin Xin-hua Huo xia Piao Zhong-xian Piao Ying-jie |
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| Institution: | 1Staff Room of Cell Biology and Genetics, 2Center Laboratory, Medical College, Shantou University, Shantou 515041, Guangdong Province, China; 3Staff Room of Histology and Embryology, Southern Medical University, Guangzhou 510515, Guangdong Province, China |
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