| Amplex Red荧光法检测组织工程瓣膜赖氨酰氧化酶活性 |
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| 引用本文： | 洪昊,董念国,史嘉玮. Amplex Red荧光法检测组织工程瓣膜赖氨酰氧化酶活性[J]. 中国胸心血管外科临床杂志, 2007, 14(1): 27-30 |
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| 作者姓名： | 洪昊 董念国 史嘉玮 |
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| 作者单位： | 华中科技大学同济医学院附属协和医院,心外科,武汉,430022 |
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| 摘 要： | 目的 采用Amplex red荧光法检测组织工程心脏瓣膜(tissue engineered heart valve,TEHV)中赖氨酰氧化酶(lysyloxidase,LOX)的活性.方法 经胰蛋白酶+乙二胺四乙酸、聚乙二醇辛基苯基醚和核酸酶处理,去除猪主动脉瓣叶的细胞成分,然后在其表面种植大鼠肌成纤维细胞,构建TEHV.用高糖培养基在体外培养瓣膜27 d,再用不含酚酞和血清的培养基培养24h,收集此时的培养基作为样本,用Amplex red荧光法检测样本中LOX的浓度,同时应用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测TEHV中LOXmRNA的表达.结果 样本中LOX的荧光值为45.60±1.66,根据标准曲线获得相应的LOX浓度为0.123±0.003 μg/ml,同时各个TEHV均有LOXmRNA的表达,与Amplex red荧光法检测的结果相一致.结论 应用Amplex red荧光法检测TEHV中LOX的活性具有可行性,并为反映LOX对TEHV细胞外基质中胶原交联的重要作用提供了方法依据.
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| 关 键 词： | Amplexred荧光法 组织工程心脏瓣膜 赖氨酰氧化酶 胶原交联 |
| 文章编号： | 1007-4848(2007)01-0027-04 |
| 修稿时间： | 2006-05-10 |
Amplex Red Fluorometric Assay for Detection of Lysyl Oxidase in Tissue Engineered Heart Valve |
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| HONG Hao,DONG Nian-guo,SHI Jia-wei. Amplex Red Fluorometric Assay for Detection of Lysyl Oxidase in Tissue Engineered Heart Valve[J]. Chinese Journal of Clinical Thoracic and Cardiovascular Surgery, 2007, 14(1): 27-30 |
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| Authors: | HONG Hao DONG Nian-guo SHI Jia-wei |
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