转化生长因子-β1诱导小鼠足细胞凋亡实验研究 |
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引用本文: | 王宇晖,童孟立,杨汝春.转化生长因子-β1诱导小鼠足细胞凋亡实验研究[J].浙江医学,2013,35(19):1718-1721. |
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作者姓名: | 王宇晖 童孟立 杨汝春 |
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作者单位: | 杭州市中医院肾内科,310007 |
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基金项目: | 浙江省中医药管理局立项资助课题(2006C108) |
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摘 要: | 目的探讨转化生长因子-β1(TGF-β1)是否能诱导小鼠足细胞株凋亡以及诱导凋亡的途径。方法(1)体外培养小鼠足细胞株;(2)应用不同浓度(10^-1~104ng/L)TGF-β1诱导小鼠足细胞凋亡;(3)10^3ng/LTGF-β1诱导不同时间(12、24、48h)后观察足细胞凋亡情况;(4)采用流式细胞仪检测AnnexinV、Caspase3;(5)实时定量PCR及Western印迹法检测p38丝裂原活化蛋白激酶(p38MAPK)、Smad2、Smad3、Smad7mRNA及蛋白质的表达情况。结果(1)小鼠足细胞在不同浓度(10^-1~10^4ng/L)TGF-β1刺激下,细胞凋亡率明显高于正常对照组(均P〈0.05);(2)随着TGF-β1浓度增加、凋亡时间增加,足细胞凋亡率增高(P〈0.05);p38MAPK、Smad2、Smad3、Smad7mRNA表达增加;TGF-β1 103ng/L为最佳诱导小鼠足细胞凋亡浓度,24h为最佳诱导凋亡时间;(3)与正常对照组比较,10^3ng/LTGF-β1诱导后Caspase3阳性细胞比率显著增加(P〈001).p38MAPK、Smad2、Smad3、Smad7蛋白质表达亦显著增加(P〈0.01)。结论TGF-β1能诱导小鼠足细胞凋亡,呈浓度及时间依赖性。TGF-β1通过Smad通路、p38MAPK通路以及线粒体通路诱导小鼠足细胞凋亡。
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关 键 词: | TGF-β1,足细胞凋亡 |
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