人乳腺癌融合蛋白疫苗HSP65-HER2的表达、纯化及活性检测 |
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作者姓名: | 曹昭 卫红飞 张培因 高广宇 胡小平 于永利 王丽颖 万敏 |
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作者单位: | 1. 吉林大学白求恩医学院分子生物学教研室,吉林,长春,130021 2. 吉林大学白求恩医学院免疫学教研室 |
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摘 要: | 目的:在大肠杆菌中表达、并纯化获得高纯度的融合蛋白疫苗HSP65-HER2。方法:经过酶切和序列分析后,将pET-28a-HSP65-HER2重组质粒转化Ecoli(BL21)中,经IPTG诱导产生6-his tag-HSP65-HER2融合蛋白,并通过Ni Sepharose 4B和Superdex G-25纯化。以纯化的重组融合蛋白免疫小鼠,取脾细胞经体外诱导后,采用CTL活性检测其活性。结果:成功的表达、纯化获得了高纯度的HSP65-HER2融合蛋白,CTL活性检测结果表明具有生物学活性。结论:获得了高纯度的HSP65-HER2融合蛋白,并证明其具有免疫学活性,为进一步研究其生物学活性奠定了基础。
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关 键 词: | 表达 纯化 热休克蛋白65 HER2表位 |
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